中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2003年
10期
848-852
,共5页
郭蕾%杨奎%李勇%司徒慧芬%陈伟京%洪梅%路金芝%卢圣栋
郭蕾%楊奎%李勇%司徒慧芬%陳偉京%洪梅%路金芝%盧聖棟
곽뢰%양규%리용%사도혜분%진위경%홍매%로금지%로골동
融合蛋白类,bcr-abl%表皮生长因子受体%基因治疗
融閤蛋白類,bcr-abl%錶皮生長因子受體%基因治療
융합단백류,bcr-abl%표피생장인자수체%기인치료
目的探讨和构建一种用于靶向性基因治疗的非病毒载体.方法采用基因工程的方法构建H1s-EGFc融合蛋白表达载体,在毕赤酵母表达系统中获得分泌表达的融合蛋白.使用阴离子交换柱及分子筛进行纯化.制备H1s-EGFc融合蛋白与pKG杀伤基因表达重组体的复合物.选用表皮生长因子受体高表达的HeLa细胞及表皮生长因子受体不表达的Jurkat细胞进行复合物特异性杀伤活性测试. 结果构建并表达了H1s-EGFc融合蛋白,所获融合蛋白纯度可达90%以上.该融合蛋白能够有效地包装杀伤基因表达载体,将其导入表皮生长因子受体特异性表达的肿瘤细胞中,达到靶向性杀伤作用,当融合蛋白/杀伤基因复合物使用剂量分别是3、6、9 μg/ml时,杀伤率分别为30.6%、36.2%和58.1%;而对表皮生长因子受体不表达的细胞无杀伤作用.结论融合蛋白H1s-EGFc能够有效地用于功能基因的包装及转运,可以作为非病毒载体应用于恶性肿瘤的靶向性基因治疗.
目的探討和構建一種用于靶嚮性基因治療的非病毒載體.方法採用基因工程的方法構建H1s-EGFc融閤蛋白錶達載體,在畢赤酵母錶達繫統中穫得分泌錶達的融閤蛋白.使用陰離子交換柱及分子篩進行純化.製備H1s-EGFc融閤蛋白與pKG殺傷基因錶達重組體的複閤物.選用錶皮生長因子受體高錶達的HeLa細胞及錶皮生長因子受體不錶達的Jurkat細胞進行複閤物特異性殺傷活性測試. 結果構建併錶達瞭H1s-EGFc融閤蛋白,所穫融閤蛋白純度可達90%以上.該融閤蛋白能夠有效地包裝殺傷基因錶達載體,將其導入錶皮生長因子受體特異性錶達的腫瘤細胞中,達到靶嚮性殺傷作用,噹融閤蛋白/殺傷基因複閤物使用劑量分彆是3、6、9 μg/ml時,殺傷率分彆為30.6%、36.2%和58.1%;而對錶皮生長因子受體不錶達的細胞無殺傷作用.結論融閤蛋白H1s-EGFc能夠有效地用于功能基因的包裝及轉運,可以作為非病毒載體應用于噁性腫瘤的靶嚮性基因治療.
목적탐토화구건일충용우파향성기인치료적비병독재체.방법채용기인공정적방법구건H1s-EGFc융합단백표체재체,재필적효모표체계통중획득분비표체적융합단백.사용음리자교환주급분자사진행순화.제비H1s-EGFc융합단백여pKG살상기인표체중조체적복합물.선용표피생장인자수체고표체적HeLa세포급표피생장인자수체불표체적Jurkat세포진행복합물특이성살상활성측시. 결과구건병표체료H1s-EGFc융합단백,소획융합단백순도가체90%이상.해융합단백능구유효지포장살상기인표체재체,장기도입표피생장인자수체특이성표체적종류세포중,체도파향성살상작용,당융합단백/살상기인복합물사용제량분별시3、6、9 μg/ml시,살상솔분별위30.6%、36.2%화58.1%;이대표피생장인자수체불표체적세포무살상작용.결론융합단백H1s-EGFc능구유효지용우공능기인적포장급전운,가이작위비병독재체응용우악성종류적파향성기인치료.
