现代临床医学生物工程学杂志
現代臨床醫學生物工程學雜誌
현대림상의학생물공정학잡지
2003年
1期
1-5
,共5页
舒雨雁%林文珍%庄茂辛%林政炯%吴祥甫%周元聪
舒雨雁%林文珍%莊茂辛%林政炯%吳祥甫%週元聰
서우안%림문진%장무신%림정형%오상보%주원총
眼镜王蛇毒%酸性磷脂酶A2%表达%复性%活性测定
眼鏡王蛇毒%痠性燐脂酶A2%錶達%複性%活性測定
안경왕사독%산성린지매A2%표체%복성%활성측정
将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(APLA2-1)基因克隆至表达载体pET28a(+),转化入大肠杆菌BL21,经过诱导,SDS-PAGE检测,重组质粒pET28a-APLA2-1在18KD有一明显的表达条带,表达产物APLA2-1约占细菌总量30%,并以包涵体的形式存在,将产物变复性后用Sephadex G-75 纯化,产物经过SDS-PAGE检测只有单一条带,通过Western-blot检测,证实纯化产物是酸性磷脂酶A2.对表达的APLA2进行酶活性和药理活性的测定.至此我们在大肠杆菌中表达了广西眼镜王蛇毒APLA2,这将为以后对PLA2的结构与功能的研究打下了良好的基础.
將廣西眼鏡王蛇毒痠性燐脂酶A2-1(APLA2-1)基因剋隆至錶達載體pET28a(+),轉化入大腸桿菌BL21,經過誘導,SDS-PAGE檢測,重組質粒pET28a-APLA2-1在18KD有一明顯的錶達條帶,錶達產物APLA2-1約佔細菌總量30%,併以包涵體的形式存在,將產物變複性後用Sephadex G-75 純化,產物經過SDS-PAGE檢測隻有單一條帶,通過Western-blot檢測,證實純化產物是痠性燐脂酶A2.對錶達的APLA2進行酶活性和藥理活性的測定.至此我們在大腸桿菌中錶達瞭廣西眼鏡王蛇毒APLA2,這將為以後對PLA2的結構與功能的研究打下瞭良好的基礎.
장엄서안경왕사독산성린지매A2-1(APLA2-1)기인극륭지표체재체pET28a(+),전화입대장간균BL21,경과유도,SDS-PAGE검측,중조질립pET28a-APLA2-1재18KD유일명현적표체조대,표체산물APLA2-1약점세균총량30%,병이포함체적형식존재,장산물변복성후용Sephadex G-75 순화,산물경과SDS-PAGE검측지유단일조대,통과Western-blot검측,증실순화산물시산성린지매A2.대표체적APLA2진행매활성화약리활성적측정.지차아문재대장간균중표체료엄서안경왕사독APLA2,저장위이후대PLA2적결구여공능적연구타하료량호적기출.
