四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2012年
5期
1169-1174
,共6页
唐天元%陈存%陈凤莲%杨毅
唐天元%陳存%陳鳳蓮%楊毅
당천원%진존%진봉련%양의
BnRCH%耐热%大肠杆菌%生长曲线
BnRCH%耐熱%大腸桿菌%生長麯線
BnRCH%내열%대장간균%생장곡선
本实验室先前通过酵母双杂交在油菜中获得一个未知基因(BnRCH),NCBI保守区域查寻表明BnRCH蛋白含有一个RINGv(RING-variant)结构域,该结构参与多种抗逆途径.为初步探索BnRCH的作用,通过RT-PCR技术,克隆BnRCH及其在其它物种中的同源基因cDNA序列,之后将各基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进行表达.通过IPTG诱导,western检测表明重组蛋白的相对分子量约为35 kD.进一步在高温环境(43℃)对其生长曲线测定,发现重组菌生长状态优于对照菌,说明BnRCH及其同源基因能提高微生物的耐热性.
本實驗室先前通過酵母雙雜交在油菜中穫得一箇未知基因(BnRCH),NCBI保守區域查尋錶明BnRCH蛋白含有一箇RINGv(RING-variant)結構域,該結構參與多種抗逆途徑.為初步探索BnRCH的作用,通過RT-PCR技術,剋隆BnRCH及其在其它物種中的同源基因cDNA序列,之後將各基因剋隆到原覈錶達載體pET-28a(+)中進行錶達.通過IPTG誘導,western檢測錶明重組蛋白的相對分子量約為35 kD.進一步在高溫環境(43℃)對其生長麯線測定,髮現重組菌生長狀態優于對照菌,說明BnRCH及其同源基因能提高微生物的耐熱性.
본실험실선전통과효모쌍잡교재유채중획득일개미지기인(BnRCH),NCBI보수구역사심표명BnRCH단백함유일개RINGv(RING-variant)결구역,해결구삼여다충항역도경.위초보탐색BnRCH적작용,통과RT-PCR기술,극륭BnRCH급기재기타물충중적동원기인cDNA서렬,지후장각기인극륭도원핵표체재체pET-28a(+)중진행표체.통과IPTG유도,western검측표명중조단백적상대분자량약위35 kD.진일보재고온배경(43℃)대기생장곡선측정,발현중조균생장상태우우대조균,설명BnRCH급기동원기인능제고미생물적내열성.
