广州医学院学报
廣州醫學院學報
엄주의학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF GUANGZHOU MEDICAL COLLEGE
2010年
3期
24-27
,共4页
谢晓谰%项红兵%陈研生%洪庆雄%招伟贤%党雪芹
謝曉讕%項紅兵%陳研生%洪慶雄%招偉賢%黨雪芹
사효란%항홍병%진연생%홍경웅%초위현%당설근
小干扰 RNA%磷脂酰肌醇激酶%基因表达
小榦擾 RNA%燐脂酰肌醇激酶%基因錶達
소간우 RNA%린지선기순격매%기인표체
目的:构建和鉴定靶向磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K) 亚单位编码基因PI3Kcb (catalytic,beta polypeptide)基因的小干扰RNA真核表达载体.方法:根据siRNA设计原则,在PI3Kcb mRNA序列中选择1个特异性靶序列,体外合成对应发卡样DNA片段,经退火后,将其定向克隆入siRNA载体pDC316-EGFP-U6,重组后获得siRNA载体质粒pDC316-PI3Kcb siRNA-EGFP,采用PCR检测和DNA测序以保证siRNA的方向和序列正确.结果:得到阳性重组克隆pDC316-PI3Kcb siRNA,经过PCR鉴定和测序,结果正确.结论:成功构建靶向PI3Kcb基因的siRNA载体pDC316-PI3Kcb siRNA-EGFP,为PI3Kcb的基因沉默研究奠定了可靠的基础.
目的:構建和鑒定靶嚮燐脂酰肌醇激酶-3(PI3K) 亞單位編碼基因PI3Kcb (catalytic,beta polypeptide)基因的小榦擾RNA真覈錶達載體.方法:根據siRNA設計原則,在PI3Kcb mRNA序列中選擇1箇特異性靶序列,體外閤成對應髮卡樣DNA片段,經退火後,將其定嚮剋隆入siRNA載體pDC316-EGFP-U6,重組後穫得siRNA載體質粒pDC316-PI3Kcb siRNA-EGFP,採用PCR檢測和DNA測序以保證siRNA的方嚮和序列正確.結果:得到暘性重組剋隆pDC316-PI3Kcb siRNA,經過PCR鑒定和測序,結果正確.結論:成功構建靶嚮PI3Kcb基因的siRNA載體pDC316-PI3Kcb siRNA-EGFP,為PI3Kcb的基因沉默研究奠定瞭可靠的基礎.
목적:구건화감정파향린지선기순격매-3(PI3K) 아단위편마기인PI3Kcb (catalytic,beta polypeptide)기인적소간우RNA진핵표체재체.방법:근거siRNA설계원칙,재PI3Kcb mRNA서렬중선택1개특이성파서렬,체외합성대응발잡양DNA편단,경퇴화후,장기정향극륭입siRNA재체pDC316-EGFP-U6,중조후획득siRNA재체질립pDC316-PI3Kcb siRNA-EGFP,채용PCR검측화DNA측서이보증siRNA적방향화서렬정학.결과:득도양성중조극륭pDC316-PI3Kcb siRNA,경과PCR감정화측서,결과정학.결론:성공구건파향PI3Kcb기인적siRNA재체pDC316-PI3Kcb siRNA-EGFP,위PI3Kcb적기인침묵연구전정료가고적기출.
