中南林业科技大学学报
中南林業科技大學學報
중남임업과기대학학보
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY OF FORESTRY & TECHNOLOGY
2011年
3期
183-186
,共4页
张玉梅%徐刚标%谷振军%安静
張玉梅%徐剛標%穀振軍%安靜
장옥매%서강표%곡진군%안정
珙桐%cpDNA%非编码序列%引物筛选
珙桐%cpDNA%非編碼序列%引物篩選
공동%cpDNA%비편마서렬%인물사선
实验采用改良CTAB方法提取总DNA,以珙桐及其近缘种基因组DNA为材料,优化cpDNA非编码序列PCR扩增条件,优据优化的PCR扩增条件,首次筛选出适合于珙桐分子谱系地理学研究的cpDNA非编码序列和引物.结果表明:25μL PCR反应体系中含有50 ng DNA,10×Buffer,2.5 mmol MgCl2,0.4 mmol dNTPs,0.2 μmol primerl,0.2 μmol primer2,1.25 U Pfu DNA Polymerase.适宜的PCR反应程序为94℃5 min,94℃1 min,退火时间45 s,退火温度和72℃延伸时间依不同的引物和产物而不同,35个循环,72℃总延伸7 min.稳定性好的、扩增条带清晰且单一的trnSGCU和trnGUUC、F71和R1516、rps16-F和rps16-R、atpB-49和rbcL-188四对引物可作为进一步珙桐分子谱系地理学研究的引物.
實驗採用改良CTAB方法提取總DNA,以珙桐及其近緣種基因組DNA為材料,優化cpDNA非編碼序列PCR擴增條件,優據優化的PCR擴增條件,首次篩選齣適閤于珙桐分子譜繫地理學研究的cpDNA非編碼序列和引物.結果錶明:25μL PCR反應體繫中含有50 ng DNA,10×Buffer,2.5 mmol MgCl2,0.4 mmol dNTPs,0.2 μmol primerl,0.2 μmol primer2,1.25 U Pfu DNA Polymerase.適宜的PCR反應程序為94℃5 min,94℃1 min,退火時間45 s,退火溫度和72℃延伸時間依不同的引物和產物而不同,35箇循環,72℃總延伸7 min.穩定性好的、擴增條帶清晰且單一的trnSGCU和trnGUUC、F71和R1516、rps16-F和rps16-R、atpB-49和rbcL-188四對引物可作為進一步珙桐分子譜繫地理學研究的引物.
실험채용개량CTAB방법제취총DNA,이공동급기근연충기인조DNA위재료,우화cpDNA비편마서렬PCR확증조건,우거우화적PCR확증조건,수차사선출괄합우공동분자보계지이학연구적cpDNA비편마서렬화인물.결과표명:25μL PCR반응체계중함유50 ng DNA,10×Buffer,2.5 mmol MgCl2,0.4 mmol dNTPs,0.2 μmol primerl,0.2 μmol primer2,1.25 U Pfu DNA Polymerase.괄의적PCR반응정서위94℃5 min,94℃1 min,퇴화시간45 s,퇴화온도화72℃연신시간의불동적인물화산물이불동,35개순배,72℃총연신7 min.은정성호적、확증조대청석차단일적trnSGCU화trnGUUC、F71화R1516、rps16-F화rps16-R、atpB-49화rbcL-188사대인물가작위진일보공동분자보계지이학연구적인물.
