CAJ | 학술논문

目的采用酶消化结合组织块培养法对山羊颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)盘细胞进行体外培养和扩增,探索TMJ关节盘细胞体外培养及扩增的新方法.方法在无菌条件下,切取一月龄山羊TMJ关节盘,剪至1.0 mm3的碎块,用0.25%胰酶、0.01%Ⅰ型胶原酶消化关节盘组织块,将消化好的组织块置入6孔板中培养.在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率,甲苯胺蓝染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定,测定其生长曲线.结果原代培养的关节盘纤维软骨细胞4天可观察到贴壁细胞,7天贴壁细胞逐渐增多,第10天时细胞彼此相连,铺满平底,细胞以梭形为主,部分多角形.传代后12小时贴壁率达90%,大部分为多角形,4～5天即可长满瓶底.甲苯胺蓝染色可见异染颗粒,胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒.结论酶消化结合组织块培养法培养的山羊TMJ关节盘细胞具有较强的增殖能力,可作为TMJ关节盘组织工程中获取大量原代细胞的实用方法.
목적채용매소화결합조직괴배양법대산양섭하합관절(temporomandibular joint,TMJ)반세포진행체외배양화확증,탐색TMJ관절반세포체외배양급확증적신방법.방법재무균조건하,절취일월령산양TMJ관절반,전지1.0 mm3적쇄괴,용0.25%이매、0.01%Ⅰ형효원매소화관절반조직괴,장소화호적조직괴치입6공판중배양.재도치현미경하련속관찰세포적형태변화급첩벽솔,갑분알람염색、Ⅰ형효원면역조화염색진행세포감정,측정기생장곡선.결과원대배양적관절반섬유연골세포4천가관찰도첩벽세포,7천첩벽세포축점증다,제10천시세포피차상련,포만평저,세포이사형위주,부분다각형.전대후12소시첩벽솔체90%,대부분위다각형,4～5천즉가장만병저.갑분알람염색가견이염과립,효원면역조화염색포장내가견종황색과립.결론매소화결합조직괴배양법배양적산양TMJ관절반세포구유교강적증식능력,가작위TMJ관절반조직공정중획취대량원대세포적실용방법.