中华损伤与修复杂志（电子版）
中華損傷與脩複雜誌（電子版）
중화손상여수복잡지（전자판）
Chinese Journal of Injury Repair and Wound Healing
2009年
6期
643-650
,共8页
李尚滨%于庆平%张文浩%霍然
李尚濱%于慶平%張文浩%霍然
리상빈%우경평%장문호%곽연
犬%脱细胞基质%气管%软骨%组织工程
犬%脫細胞基質%氣管%軟骨%組織工程
견%탈세포기질%기관%연골%조직공정
目的 初步探寻同种异体气管软骨脱细胞基质与向软骨诱导的骨髓间充质干细胞(MSCs)共同构建组织工程化气管的可行性.方法 分离并诱导宿主犬MSCs向软骨细胞分化,通过内蛋白多糖含量测量及Ⅱ型胶原免疫组化染色观察初步诱导效果.使用曲拉通化学消化法对供体犬气管软骨进行脱细胞处理,根据消化时间分组,观察气管软骨脱细胞基质制备效果.将诱导后MSCs与同种异体气管软骨脱细胞基质分别进行体外与体内复合培养,组织学及电镜下观察诱导细胞的生长情况,以进行构建组织工程化气管可行性初步分析.结果 宿主犬MSCs软骨方向诱导后诱导组细胞培养液内蛋白多糖含量为(42.48±2.32)μg/ml,较未诱导组(19.62±1.30)μg/ml明显增高(p<0.01),诱导组细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性.HE染色及扫描电镜均可见120小时组供体犬气管组织黏膜细胞及软骨细胞完全消失,软骨基质结构完整.体外联合培养7天内可见诱导后MSCs在脱细胞软骨基质表面生长,14天时细胞逐渐凋亡;体内联合培养可见诱导细胞在软骨基质浅层生长,但基质内部未见细胞成分生长,并无新生软骨形成.结论 使用曲拉通化学消化法可成功制备结构完整的同种异体气管软骨脱细胞基质,但作为构建组织工程化气管的支架材料,其空隙率和贯通性仍需进一步改进.
目的 初步探尋同種異體氣管軟骨脫細胞基質與嚮軟骨誘導的骨髓間充質榦細胞(MSCs)共同構建組織工程化氣管的可行性.方法 分離併誘導宿主犬MSCs嚮軟骨細胞分化,通過內蛋白多糖含量測量及Ⅱ型膠原免疫組化染色觀察初步誘導效果.使用麯拉通化學消化法對供體犬氣管軟骨進行脫細胞處理,根據消化時間分組,觀察氣管軟骨脫細胞基質製備效果.將誘導後MSCs與同種異體氣管軟骨脫細胞基質分彆進行體外與體內複閤培養,組織學及電鏡下觀察誘導細胞的生長情況,以進行構建組織工程化氣管可行性初步分析.結果 宿主犬MSCs軟骨方嚮誘導後誘導組細胞培養液內蛋白多糖含量為(42.48±2.32)μg/ml,較未誘導組(19.62±1.30)μg/ml明顯增高(p<0.01),誘導組細胞Ⅱ型膠原免疫組化染色暘性.HE染色及掃描電鏡均可見120小時組供體犬氣管組織黏膜細胞及軟骨細胞完全消失,軟骨基質結構完整.體外聯閤培養7天內可見誘導後MSCs在脫細胞軟骨基質錶麵生長,14天時細胞逐漸凋亡;體內聯閤培養可見誘導細胞在軟骨基質淺層生長,但基質內部未見細胞成分生長,併無新生軟骨形成.結論 使用麯拉通化學消化法可成功製備結構完整的同種異體氣管軟骨脫細胞基質,但作為構建組織工程化氣管的支架材料,其空隙率和貫通性仍需進一步改進.
목적 초보탐심동충이체기관연골탈세포기질여향연골유도적골수간충질간세포(MSCs)공동구건조직공정화기관적가행성.방법 분리병유도숙주견MSCs향연골세포분화,통과내단백다당함량측량급Ⅱ형효원면역조화염색관찰초보유도효과.사용곡랍통화학소화법대공체견기관연골진행탈세포처리,근거소화시간분조,관찰기관연골탈세포기질제비효과.장유도후MSCs여동충이체기관연골탈세포기질분별진행체외여체내복합배양,조직학급전경하관찰유도세포적생장정황,이진행구건조직공정화기관가행성초보분석.결과 숙주견MSCs연골방향유도후유도조세포배양액내단백다당함량위(42.48±2.32)μg/ml,교미유도조(19.62±1.30)μg/ml명현증고(p<0.01),유도조세포Ⅱ형효원면역조화염색양성.HE염색급소묘전경균가견120소시조공체견기관조직점막세포급연골세포완전소실,연골기질결구완정.체외연합배양7천내가견유도후MSCs재탈세포연골기질표면생장,14천시세포축점조망;체내연합배양가견유도세포재연골기질천층생장,단기질내부미견세포성분생장,병무신생연골형성.결론 사용곡랍통화학소화법가성공제비결구완정적동충이체기관연골탈세포기질,단작위구건조직공정화기관적지가재료,기공극솔화관통성잉수진일보개진.
