中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
6期
164-167
,共4页
张瑞岩%商立民%张宁%刘全%吴永魁
張瑞巖%商立民%張寧%劉全%吳永魁
장서암%상립민%장저%류전%오영괴
利氏曼原虫%实时荧光定量PCR%小环状动基体DNA
利氏曼原蟲%實時熒光定量PCR%小環狀動基體DNA
리씨만원충%실시형광정량PCR%소배상동기체DNA
以利什曼原虫的小环状动基体DNA(Leishmania kDNA)为靶基因,建立实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法.根据GenBank报道的利什曼原虫小环状动基体DNA保守序列设计合成特异性引物,经PCR扩增后与pMD18-T载体连接,转化人大肠杆菌DH5α感受态细胞.挑选阳性克隆重组质粒经鉴定正确后,作为模板建立SYBR-Green Ⅰ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线.结果构建的标准曲线线性关系良好,相关系数为0.996,而且特异性强,重复性好.本研究成功建立了实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法,该方法可用于利氏曼原虫病的诊断、流行病学监测和科学研究.
以利什曼原蟲的小環狀動基體DNA(Leishmania kDNA)為靶基因,建立實時熒光定量PCR檢測利什曼原蟲的方法.根據GenBank報道的利什曼原蟲小環狀動基體DNA保守序列設計閤成特異性引物,經PCR擴增後與pMD18-T載體連接,轉化人大腸桿菌DH5α感受態細胞.挑選暘性剋隆重組質粒經鑒定正確後,作為模闆建立SYBR-Green Ⅰ熒光定量PCR標準麯線和鎔解麯線.結果構建的標準麯線線性關繫良好,相關繫數為0.996,而且特異性彊,重複性好.本研究成功建立瞭實時熒光定量PCR檢測利什曼原蟲的方法,該方法可用于利氏曼原蟲病的診斷、流行病學鑑測和科學研究.
이리십만원충적소배상동기체DNA(Leishmania kDNA)위파기인,건립실시형광정량PCR검측리십만원충적방법.근거GenBank보도적리십만원충소배상동기체DNA보수서렬설계합성특이성인물,경PCR확증후여pMD18-T재체련접,전화인대장간균DH5α감수태세포.도선양성극륭중조질립경감정정학후,작위모판건립SYBR-Green Ⅰ형광정량PCR표준곡선화용해곡선.결과구건적표준곡선선성관계량호,상관계수위0.996,이차특이성강,중복성호.본연구성공건립료실시형광정량PCR검측리십만원충적방법,해방법가용우리씨만원충병적진단、류행병학감측화과학연구.
