CAJ | 학술논문

背景与目的通过经肺癌肿瘤可溶性抗原(TSA)和超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)联合修饰致敏树突状细胞(DC)体外诱导对肺癌细胞杀伤作用的研究,为以DC为基础的肺癌免疫瘤苗的临床应用提供一定的实验依据.方法 3M KCI法提取人肺癌可溶性抗原;从人外周血单个核细胞(PBMC)中诱导扩增DC并鉴定;肺癌TSA和不同质量浓度的SEA联合修饰致敏DC;以联合抗原修饰后的DC、单纯肺癌抗原致敏的DC和未经抗原修饰的DC分别与同种异体T淋巴细胞共同孵育,MTT法测定混合淋巴细胞反应中DC的免疫刺激活性,诱导产生具有识别肺癌抗原的特异性CTL(作为效应细胞分别称为TSA-SEA-DCL、TSA-DCL、DCL);用流式细胞仪FCS及免疫染色法分析鉴定DC和效应细胞表型;M1T法检测各效应细胞对靶细胞体外杀伤效应.结果诱导出表达CD1a,CD80,HLA-DR分子的DC;经肺癌TSA和SEA联合修饰致敏后,上述分子表达上调;联合修饰后的DC具有较强的免疫刺激活性,DC/T比例1:10可能为最适比例;TSA-SEA-DCL中CD3+CD8+细胞的比例大幅度增加;TSA-SEA-DCL对靶细胞GLC-82的杀伤率明显高于TSA-DCL及DCL,亦明显高于对肺癌CALU-6和人红白血病K562细胞的杀伤率.结论经肺癌TsA和sE^联合修饰致敏的DC可诱导同种异体T淋巴细胞活化增殖产生CD8+表达增加的CTL;联合抗原诱导的DC疫苗对肺癌细胞有高效特异性的杀伤作用,肺癌TSA和超抗原SEA联合修饰的DC的活性明显强于单用肺癌TSA修饰.
배경여목적 통과경폐암종류가용성항원(TSA)화초항원금황색포도구균장독소A(SEA)연합수식치민수돌상세포(DC)체외유도대폐암세포살상작용적연구,위이DC위기출적폐암면역류묘적림상응용제공일정적실험의거.방법 3M KCI법제취인폐암가용성항원;종인외주혈단개핵세포(PBMC)중유도확증DC병감정;폐암TSA화불동질량농도적SEA연합수식치민DC;이연합항원수식후적DC、단순폐암항원치민적DC화미경항원수식적DC분별여동충이체T림파세포공동부육,MTT법측정혼합림파세포반응중DC적면역자격활성,유도산생구유식별폐암항원적특이성CTL(작위효응세포분별칭위TSA-SEA-DCL、TSA-DCL、DCL);용류식세포의FCS급면역염색법분석감정DC화효응세포표형;M1T법검측각효응세포대파세포체외살상효응.결과 유도출표체CD1a,CD80,HLA-DR분자적DC;경폐암TSA화SEA연합수식치민후,상술분자표체상조;연합수식후적DC구유교강적면역자격활성,DC/T비례1:10가능위최괄비례;TSA-SEA-DCL중CD3+CD8+세포적비례대폭도증가;TSA-SEA-DCL대파세포GLC-82적살상솔명현고우TSA-DCL급DCL,역명현고우대폐암CALU-6화인홍백혈병K562세포적살상솔.결론 경폐암TsA화sE^연합수식치민적DC가유도동충이체T림파세포활화증식산생CD8+표체증가적CTL;연합항원유도적DC역묘대폐암세포유고효특이성적살상작용,폐암TSA화초항원SEA연합수식적DC적활성명현강우단용폐암TSA수식.