长治医学院学报
長治醫學院學報
장치의학원학보
JOURNAL OF CHANGZHI MEDICAL COLLEGE
2009年
3期
172-175
,共4页
幽门螺杆菌%热休克蛋白A%重组载体%基因表达
幽門螺桿菌%熱休剋蛋白A%重組載體%基因錶達
유문라간균%열휴극단백A%중조재체%기인표체
目的:扩增人幽门螺杆菌(Helicobacter py lori,Hp)热休克蛋白A(heat shock prot ein A,HspA)编码基因并构建其重组表达载体,进行核苷酸序列分析,并在E.coli BL21中表达,为疫苗的开发奠定了基础.方法:利用PCR技术从Hp基因组DNA中扩增热休克蛋白A(HspA)基因片段,目的基因经SacⅠ和XhoⅠ双酶切、纯化后,插入pET32a(+)载体.以含目的基因片段的重组载体转化大肠杆菌BL21并表达.结果:经PCR、酶切、测序分析表明 ,插入的基因片段为Hp HspA编码基因,与GenBank报道的相比较,核酸同源性达98%.经SDS-PAGE 分析,表达的融合蛋白分子量约为33 KD,其中目的蛋白的分子量约为13 KD.结论:成功地克隆并表达了Hp HspA编码基因,为HspA蛋白质疫苗的研制和快速诊断试剂盒的开发奠定了良好的基础.
目的:擴增人幽門螺桿菌(Helicobacter py lori,Hp)熱休剋蛋白A(heat shock prot ein A,HspA)編碼基因併構建其重組錶達載體,進行覈苷痠序列分析,併在E.coli BL21中錶達,為疫苗的開髮奠定瞭基礎.方法:利用PCR技術從Hp基因組DNA中擴增熱休剋蛋白A(HspA)基因片段,目的基因經SacⅠ和XhoⅠ雙酶切、純化後,插入pET32a(+)載體.以含目的基因片段的重組載體轉化大腸桿菌BL21併錶達.結果:經PCR、酶切、測序分析錶明 ,插入的基因片段為Hp HspA編碼基因,與GenBank報道的相比較,覈痠同源性達98%.經SDS-PAGE 分析,錶達的融閤蛋白分子量約為33 KD,其中目的蛋白的分子量約為13 KD.結論:成功地剋隆併錶達瞭Hp HspA編碼基因,為HspA蛋白質疫苗的研製和快速診斷試劑盒的開髮奠定瞭良好的基礎.
목적:확증인유문라간균(Helicobacter py lori,Hp)열휴극단백A(heat shock prot ein A,HspA)편마기인병구건기중조표체재체,진행핵감산서렬분석,병재E.coli BL21중표체,위역묘적개발전정료기출.방법:이용PCR기술종Hp기인조DNA중확증열휴극단백A(HspA)기인편단,목적기인경SacⅠ화XhoⅠ쌍매절、순화후,삽입pET32a(+)재체.이함목적기인편단적중조재체전화대장간균BL21병표체.결과:경PCR、매절、측서분석표명 ,삽입적기인편단위Hp HspA편마기인,여GenBank보도적상비교,핵산동원성체98%.경SDS-PAGE 분석,표체적융합단백분자량약위33 KD,기중목적단백적분자량약위13 KD.결론:성공지극륭병표체료Hp HspA편마기인,위HspA단백질역묘적연제화쾌속진단시제합적개발전정료량호적기출.
