中国肿瘤临床
中國腫瘤臨床
중국종류림상
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY
2012年
15期
1060-1064
,共5页
余娜莎%何文静%黎军和%魏芹%彭小东
餘娜莎%何文靜%黎軍和%魏芹%彭小東
여나사%하문정%려군화%위근%팽소동
慢病毒载体%RNA干扰%Livin%大肠癌%凋亡
慢病毒載體%RNA榦擾%Livin%大腸癌%凋亡
만병독재체%RNA간우%Livin%대장암%조망
目的:探讨慢病毒载体介导RNA干扰(RNAi)抑制大肠癌细胞系HT-29细胞Livin基因表达对其生物学行为的影响.方法:设计、合成靶向Livin的siRNA,构建pGCSIL-GFP慢病毒载体,采用Real-time PCR和Western blot方法观察对人大肠癌HT-29细胞Livin mRNA及蛋白质表达的抑制;并通过台盼蓝拒染法、原位末端标记法(TUNEL)、流式细胞术及Matrigel穿膜侵袭实验检测细胞增殖、凋亡、细胞周期及细胞侵袭性的变化.结果:重组慢病毒Livin-RNAi-LV1能够有效抑制Livin的表达,使Livin mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01);Livin沉默能抑制HT-29细胞增殖(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.01),细胞周期重新分布,G0/Gl期细胞比例升高(P<0.05),S期细胞比例降低(P<0.05),G2/M期细胞比例降低(P<0.05).HT-29细胞体外侵袭能力也明显减弱(P<0.01).结论:利用慢病毒载体介导RNA干扰技术沉默Livin基因的表达可以抑制大肠癌HT-29细胞增殖,促进细胞凋亡,使细胞侵袭性减弱.
目的:探討慢病毒載體介導RNA榦擾(RNAi)抑製大腸癌細胞繫HT-29細胞Livin基因錶達對其生物學行為的影響.方法:設計、閤成靶嚮Livin的siRNA,構建pGCSIL-GFP慢病毒載體,採用Real-time PCR和Western blot方法觀察對人大腸癌HT-29細胞Livin mRNA及蛋白質錶達的抑製;併通過檯盼藍拒染法、原位末耑標記法(TUNEL)、流式細胞術及Matrigel穿膜侵襲實驗檢測細胞增殖、凋亡、細胞週期及細胞侵襲性的變化.結果:重組慢病毒Livin-RNAi-LV1能夠有效抑製Livin的錶達,使Livin mRNA和蛋白錶達水平明顯降低(P<0.01);Livin沉默能抑製HT-29細胞增殖(P<0.05),細胞凋亡增加(P<0.01),細胞週期重新分佈,G0/Gl期細胞比例升高(P<0.05),S期細胞比例降低(P<0.05),G2/M期細胞比例降低(P<0.05).HT-29細胞體外侵襲能力也明顯減弱(P<0.01).結論:利用慢病毒載體介導RNA榦擾技術沉默Livin基因的錶達可以抑製大腸癌HT-29細胞增殖,促進細胞凋亡,使細胞侵襲性減弱.
목적:탐토만병독재체개도RNA간우(RNAi)억제대장암세포계HT-29세포Livin기인표체대기생물학행위적영향.방법:설계、합성파향Livin적siRNA,구건pGCSIL-GFP만병독재체,채용Real-time PCR화Western blot방법관찰대인대장암HT-29세포Livin mRNA급단백질표체적억제;병통과태반람거염법、원위말단표기법(TUNEL)、류식세포술급Matrigel천막침습실험검측세포증식、조망、세포주기급세포침습성적변화.결과:중조만병독Livin-RNAi-LV1능구유효억제Livin적표체,사Livin mRNA화단백표체수평명현강저(P<0.01);Livin침묵능억제HT-29세포증식(P<0.05),세포조망증가(P<0.01),세포주기중신분포,G0/Gl기세포비례승고(P<0.05),S기세포비례강저(P<0.05),G2/M기세포비례강저(P<0.05).HT-29세포체외침습능력야명현감약(P<0.01).결론:이용만병독재체개도RNA간우기술침묵Livin기인적표체가이억제대장암HT-29세포증식,촉진세포조망,사세포침습성감약.
