河北农业大学学报
河北農業大學學報
하북농업대학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI
2009年
1期
82-85
,共4页
苏晓鸥%李玉荣%乔俊文%赵德明
囌曉鷗%李玉榮%喬俊文%趙德明
소효구%리옥영%교준문%조덕명
猪繁殖与呼吸综合征%PRRSV%ORF6%RT-PCR%检测
豬繁殖與呼吸綜閤徵%PRRSV%ORF6%RT-PCR%檢測
저번식여호흡종합정%PRRSV%ORF6%RT-PCR%검측
根据GeneBank中已经发表的PRRSV毒株的ORF6基因高度保守序列,设计并合成了一对特异性引物,建立了用于检测PRRSV的RT-PCR诊断方法.从感染PRRSV-QD的Marc-145细胞中提取病毒RNA,然后经RT-PCR扩增,获得预期266 bp的目的片断,而猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒(PCV)细胞培养物及Marc-145细胞进行同条件检测,结果为阴性;PRRSV扩增产物测序结果与GeneBank中已发表的PRRSV毒株序列同源性达94.4%～97.4%且应用本研究检测方法对已知基因型的10株PRRSV盲检,检出率100%.上述研究结果表明,所建立的RT-PCR诊断方法特异性好、敏感性高,可进一步应用于猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断.
根據GeneBank中已經髮錶的PRRSV毒株的ORF6基因高度保守序列,設計併閤成瞭一對特異性引物,建立瞭用于檢測PRRSV的RT-PCR診斷方法.從感染PRRSV-QD的Marc-145細胞中提取病毒RNA,然後經RT-PCR擴增,穫得預期266 bp的目的片斷,而豬偽狂犬病毒(PRV)、豬細小病毒(PPV)、豬圓環病毒(PCV)細胞培養物及Marc-145細胞進行同條件檢測,結果為陰性;PRRSV擴增產物測序結果與GeneBank中已髮錶的PRRSV毒株序列同源性達94.4%～97.4%且應用本研究檢測方法對已知基因型的10株PRRSV盲檢,檢齣率100%.上述研究結果錶明,所建立的RT-PCR診斷方法特異性好、敏感性高,可進一步應用于豬繁殖與呼吸綜閤徵的臨床診斷.
근거GeneBank중이경발표적PRRSV독주적ORF6기인고도보수서렬,설계병합성료일대특이성인물,건립료용우검측PRRSV적RT-PCR진단방법.종감염PRRSV-QD적Marc-145세포중제취병독RNA,연후경RT-PCR확증,획득예기266 bp적목적편단,이저위광견병독(PRV)、저세소병독(PPV)、저원배병독(PCV)세포배양물급Marc-145세포진행동조건검측,결과위음성;PRRSV확증산물측서결과여GeneBank중이발표적PRRSV독주서렬동원성체94.4%～97.4%차응용본연구검측방법대이지기인형적10주PRRSV맹검,검출솔100%.상술연구결과표명,소건립적RT-PCR진단방법특이성호、민감성고,가진일보응용우저번식여호흡종합정적림상진단.
