CAJ | 학술논문

目的评价SYBR Green I实时荧光定量多重PCR结合熔解曲线分析快速筛查葡萄球菌常见大环内酯类耐药基因的可行性,利用此筛查方法了解深圳地区葡萄球菌中大环内酯类耐药基因的分布情况.方法选取经测序鉴定携带有大环内酯类耐药基因ermA,ermB,ermC,msrA的葡萄球菌,用一个包括这四种耐药基因引物的SYBR Gteen I多重实时荧光定量PCR检测,经荧光定量曲线和熔解温度曲线(Tm值)确证和反应条件优化后建立针对大环内酯类常见耐药基因的初筛体系;随机选取临床136株葡萄球菌,利用此初筛体系对136株葡萄球菌是否携带常见大环内酯类耐药基因进行检测,并对检测结果和表型、电泳、测序结果进行比较,从而对此方法进行评价.对携带有大环内酯类耐药基因的细菌进行基因型别的鉴定,以了解大环内酯类耐药基因的分布情况.结果此SYBR Green I实时荧光定量多重PCR初筛体系检测葡萄球菌常见大环内酯类耐药基因与表型检测比较达到94.8%(129/136)的一致性,与琼脂糖凝胶电泳结果和测序结果比较达到100%的一致性.136株葡萄球菌检出msrA,ermA,ermB,ermC四种耐药基因,耐药基因总检出率为75.7%(103/136),并发现多株携带多种大环内酯类耐药基因的葡萄球菌.结论 SYBR Green I实时荧光定量多重PCR可以快速准确地筛查葡萄球菌是否携带有常见的大环内酯类耐药基因;深圳地区葡萄球菌大环内酯类耐药率较高,主要耐药基因是ermC 56.6%(77/136),msrA24.2%(33/136),ermA12.5%(17/136).
목적 평개SYBR Green I실시형광정량다중PCR결합용해곡선분석쾌속사사포도구균상견대배내지류내약기인적가행성,이용차사사방법료해심수지구포도구균중대배내지류내약기인적분포정황.방법 선취경측서감정휴대유대배내지류내약기인ermA,ermB,ermC,msrA적포도구균,용일개포괄저사충내약기인인물적SYBR Gteen I다중실시형광정량PCR검측,경형광정량곡선화용해온도곡선(Tm치)학증화반응조건우화후건립침대대배내지류상견내약기인적초사체계;수궤선취림상136주포도구균,이용차초사체계대136주포도구균시부휴대상견대배내지류내약기인진행검측,병대검측결과화표형、전영、측서결과진행비교,종이대차방법진행평개.대휴대유대배내지류내약기인적세균진행기인형별적감정,이료해대배내지류내약기인적분포정황.결과 차SYBR Green I실시형광정량다중PCR초사체계검측포도구균상견대배내지류내약기인여표형검측비교체도94.8%(129/136)적일치성,여경지당응효전영결과화측서결과비교체도100%적일치성.136주포도구균검출msrA,ermA,ermB,ermC사충내약기인,내약기인총검출솔위75.7%(103/136),병발현다주휴대다충대배내지류내약기인적포도구균.결론 SYBR Green I실시형광정량다중PCR가이쾌속준학지사사포도구균시부휴대유상견적대배내지류내약기인;심수지구포도구균대배내지류내약솔교고,주요내약기인시ermC 56.6%(77/136),msrA24.2%(33/136),ermA12.5%(17/136).