生物学通报
生物學通報
생물학통보
BULLETIN OF BIOLOGY
2008年
5期
47-50
,共4页
武志强%贾耐兵%李娜%王瑞菊%马百成%王翠艳%李明刚
武誌彊%賈耐兵%李娜%王瑞菊%馬百成%王翠豔%李明剛
무지강%가내병%리나%왕서국%마백성%왕취염%리명강
酿酒酵母%rDNA%整合载体%磷酸丙糖异构酶%绿色荧光蛋白
釀酒酵母%rDNA%整閤載體%燐痠丙糖異構酶%綠色熒光蛋白
양주효모%rDNA%정합재체%린산병당이구매%록색형광단백
选取酿酒酵母基因组rDNA序列中25S和5S rDNA之间的一段约2.2 kb序列作为整合载体同源重组到酿酒酵母基因组中的靶位点,PCR扩增得到该段序列左右2段大小分别为865 bp和1 350 bp的片段,将其与 URA3、磷酸丙糖异构酶启动子和终止子序列依次克隆入pUC18中,构建成整合型载体pNK.以绿色荧光蛋白基因为报告基因,荧光显微镜下观察到酿酒酵母菌株INVSc1转化子发出较强荧光,Southern 杂交产生目的条带,这些结果表明载体 pNK 具有整合并表达外源基因功能.通过对转化子连续培养证明构建的整合型载体的稳定性较高.
選取釀酒酵母基因組rDNA序列中25S和5S rDNA之間的一段約2.2 kb序列作為整閤載體同源重組到釀酒酵母基因組中的靶位點,PCR擴增得到該段序列左右2段大小分彆為865 bp和1 350 bp的片段,將其與 URA3、燐痠丙糖異構酶啟動子和終止子序列依次剋隆入pUC18中,構建成整閤型載體pNK.以綠色熒光蛋白基因為報告基因,熒光顯微鏡下觀察到釀酒酵母菌株INVSc1轉化子髮齣較彊熒光,Southern 雜交產生目的條帶,這些結果錶明載體 pNK 具有整閤併錶達外源基因功能.通過對轉化子連續培養證明構建的整閤型載體的穩定性較高.
선취양주효모기인조rDNA서렬중25S화5S rDNA지간적일단약2.2 kb서렬작위정합재체동원중조도양주효모기인조중적파위점,PCR확증득도해단서렬좌우2단대소분별위865 bp화1 350 bp적편단,장기여 URA3、린산병당이구매계동자화종지자서렬의차극륭입pUC18중,구건성정합형재체pNK.이록색형광단백기인위보고기인,형광현미경하관찰도양주효모균주INVSc1전화자발출교강형광,Southern 잡교산생목적조대,저사결과표명재체 pNK 구유정합병표체외원기인공능.통과대전화자련속배양증명구건적정합형재체적은정성교고.
