CAJ | 학술논문

目的:研究肝癌组织中DNA依赖蛋白激酶催化亚基DNA-PKcs的表达差异及其生物学意义.方法:用组织芯片和免疫组化法检测肝胆癌组织86例,肝胆管结石切除肝组织17例标本和正常肝组织70例中DNA-PKcs蛋白表达情况,Western blot检测培养细胞中DNA-PKcs表达,Lipofectamine 2000介导DNA-PKcs的siRNA质粒DNA转染,细胞生长曲线分斩细胞增殖,克隆形成法分析细胞辐射敏感性.结果:组织芯片检测显示,60例肝癌组织细胞中DNA-PKc s阳性表达率＜25%(极低表达),25%-50%(低表达),51%-75%(中等表达)和＞75%(高表达)分别占15%,20%,23.3%和41.7%,而64例正常肝组织中各DNA-PKcs阳性表达率分别为68.7%,10.9%,12.6%和7.8%,表明癌组织DNA-PKcs的表达水平显著高于正常组织(P=0.0008).26例肝癌组织病理切片的免疫组化结果也显示,其DNA-PKcs表达水平显著高于23例非肿瘤性肝组织(P=0.001).Western blot检测结果显示,体外培养的肝癌细胞HepG2,7721和7402中DNA-PKcs表达水平,同样显著高于正常肝细胞LO2.siRNA分子靶向抑制DNA-PKcs表达,不但显著提高HepG2细胞对电离辐射的敏感性,同时还降低肝癌细胞的增殖速度.随着DNA-PKcs表达的抑制,癌基因c-Myc蛋白表达水平也显著降低.结论:肝癌组织细胞中DNA-PKcs表达水平显著高于正常肝组织和非肿瘤性肝病理组织,siRNA抑制DNA-PKcs表达,具有抗癌细胞增殖和放射增敏作用,c-Myc蛋白表达抑制可能是其抗增殖作用的相关机制之一.
목적:연구간암조직중DNA의뢰단백격매최화아기DNA-PKcs적표체차이급기생물학의의.방법:용조직심편화면역조화법검측간담암조직86례,간담관결석절제간조직17례표본화정상간조직70례중DNA-PKcs단백표체정황,Western blot검측배양세포중DNA-PKcs표체,Lipofectamine 2000개도DNA-PKcs적siRNA질립DNA전염,세포생장곡선분참세포증식,극륭형성법분석세포복사민감성.결과:조직심편검측현시,60례간암조직세포중DNA-PKc s양성표체솔＜25%(겁저표체),25%-50%(저표체),51%-75%(중등표체)화＞75%(고표체)분별점15%,20%,23.3%화41.7%,이64례정상간조직중각DNA-PKcs양성표체솔분별위68.7%,10.9%,12.6%화7.8%,표명암조직DNA-PKcs적표체수평현저고우정상조직(P=0.0008).26례간암조직병리절편적면역조화결과야현시,기DNA-PKcs표체수평현저고우23례비종류성간조직(P=0.001).Western blot검측결과현시,체외배양적간암세포HepG2,7721화7402중DNA-PKcs표체수평,동양현저고우정상간세포LO2.siRNA분자파향억제DNA-PKcs표체,불단현저제고HepG2세포대전리복사적민감성,동시환강저간암세포적증식속도.수착DNA-PKcs표체적억제,암기인c-Myc단백표체수평야현저강저.결론:간암조직세포중DNA-PKcs표체수평현저고우정상간조직화비종류성간병리조직,siRNA억제DNA-PKcs표체,구유항암세포증식화방사증민작용,c-Myc단백표체억제가능시기항증식작용적상관궤제지일.