中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2007年
12期
924-929
,共6页
路东%张甲菊%杨福军%席仲兴%彭林峰%张正雷%张云涛
路東%張甲菊%楊福軍%席仲興%彭林峰%張正雷%張雲濤
로동%장갑국%양복군%석중흥%팽림봉%장정뢰%장운도
α1-酸性糖蛋白%杂交瘤%单克隆抗体%酶联免疫吸附试验
α1-痠性糖蛋白%雜交瘤%單剋隆抗體%酶聯免疫吸附試驗
α1-산성당단백%잡교류%단극륭항체%매련면역흡부시험
目的 制备α1-酸性糖蛋白(α1-Acid glycoprotein,α1-AGP)单克隆抗体(McAb),建立α1-AGP的ELISA检测方法,用于检测人体血液、尿液及各种组织液中α1-AGP的水平.方法 用高氯酸沉淀人血清中α1-AGP,经离子交换层析和高压液相层析纯化后,免疫BALB/c小鼠,建立特异性抗α1-AGP单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备并鉴定McAbs,分析各株分泌抗体的效价、特异性、位阻群、类及亚类.制备针对α1-AGP的双抗体夹心ELLSA检测试剂盒,分析其稳定性、灵敏度和特异性,并进行临床评价.结果 建立了9株特异性抗α1-AGP单克隆抗体杂交瘤细胞株,均分泌IgG抗体,所有抗体的轻链均为κ链.根据位阻分析结果,将9个细胞株分泌的抗体分为5个位阻群,腹水效价在1×10-4～×10-7之间,且均有较好特异性.制备的α1-AGP双抗体夹心ELISA试剂盒灵敏度达2 ng/ml,且检测结果与α1-AGP含量呈现良好的线性关系(γ=0.9916),并与其他血清蛋白无交叉反应,试剂盒置37℃放置3d及4℃放置2个月,稳定性良好.用该试剂盒检测96份正常人血样,其α1-AGP平均值为0.43～1.32mg/ml;105份Ⅱ型糖尿病患者血样,其平均值为0.88～2.35mg/ml,经统计学分析,两者差异有显著意义.结论 已成功制备出α1-AGP McAb,并建立了针对α1-AGP的双抗体夹心ELISA,制备的试剂盒可用于临床检测.
目的 製備α1-痠性糖蛋白(α1-Acid glycoprotein,α1-AGP)單剋隆抗體(McAb),建立α1-AGP的ELISA檢測方法,用于檢測人體血液、尿液及各種組織液中α1-AGP的水平.方法 用高氯痠沉澱人血清中α1-AGP,經離子交換層析和高壓液相層析純化後,免疫BALB/c小鼠,建立特異性抗α1-AGP單剋隆抗體雜交瘤細胞株,製備併鑒定McAbs,分析各株分泌抗體的效價、特異性、位阻群、類及亞類.製備針對α1-AGP的雙抗體夾心ELLSA檢測試劑盒,分析其穩定性、靈敏度和特異性,併進行臨床評價.結果 建立瞭9株特異性抗α1-AGP單剋隆抗體雜交瘤細胞株,均分泌IgG抗體,所有抗體的輕鏈均為κ鏈.根據位阻分析結果,將9箇細胞株分泌的抗體分為5箇位阻群,腹水效價在1×10-4～×10-7之間,且均有較好特異性.製備的α1-AGP雙抗體夾心ELISA試劑盒靈敏度達2 ng/ml,且檢測結果與α1-AGP含量呈現良好的線性關繫(γ=0.9916),併與其他血清蛋白無交扠反應,試劑盒置37℃放置3d及4℃放置2箇月,穩定性良好.用該試劑盒檢測96份正常人血樣,其α1-AGP平均值為0.43～1.32mg/ml;105份Ⅱ型糖尿病患者血樣,其平均值為0.88～2.35mg/ml,經統計學分析,兩者差異有顯著意義.結論 已成功製備齣α1-AGP McAb,併建立瞭針對α1-AGP的雙抗體夾心ELISA,製備的試劑盒可用于臨床檢測.
목적 제비α1-산성당단백(α1-Acid glycoprotein,α1-AGP)단극륭항체(McAb),건립α1-AGP적ELISA검측방법,용우검측인체혈액、뇨액급각충조직액중α1-AGP적수평.방법 용고록산침정인혈청중α1-AGP,경리자교환층석화고압액상층석순화후,면역BALB/c소서,건립특이성항α1-AGP단극륭항체잡교류세포주,제비병감정McAbs,분석각주분비항체적효개、특이성、위조군、류급아류.제비침대α1-AGP적쌍항체협심ELLSA검측시제합,분석기은정성、령민도화특이성,병진행림상평개.결과 건립료9주특이성항α1-AGP단극륭항체잡교류세포주,균분비IgG항체,소유항체적경련균위κ련.근거위조분석결과,장9개세포주분비적항체분위5개위조군,복수효개재1×10-4～×10-7지간,차균유교호특이성.제비적α1-AGP쌍항체협심ELISA시제합령민도체2 ng/ml,차검측결과여α1-AGP함량정현량호적선성관계(γ=0.9916),병여기타혈청단백무교차반응,시제합치37℃방치3d급4℃방치2개월,은정성량호.용해시제합검측96빈정상인혈양,기α1-AGP평균치위0.43～1.32mg/ml;105빈Ⅱ형당뇨병환자혈양,기평균치위0.88～2.35mg/ml,경통계학분석,량자차이유현저의의.결론 이성공제비출α1-AGP McAb,병건립료침대α1-AGP적쌍항체협심ELISA,제비적시제합가용우림상검측.
