中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2007年
10期
1374-1377
,共4页
张黎明%章祖招%张鑫圣%吴晓宇%李招云
張黎明%章祖招%張鑫聖%吳曉宇%李招雲
장려명%장조초%장흠골%오효우%리초운
前列腺癌%外周血%DD3 mRNA%实时RT-PCR
前列腺癌%外週血%DD3 mRNA%實時RT-PCR
전렬선암%외주혈%DD3 mRNA%실시RT-PCR
目的 建立一种新的方法定量检测前列腺癌(PC)患者外周血DD3mRNA方法扩增LNCaP细胞株阳性表达的DD3mRNA,并以其扩增产物为外标准,通过优选引物及优化PCR的各项参数,建立了SYBR Green实时RT-PCR定量检测PC患者外周血DD3 mRNA的方法,并以此方法检测了健康男性志愿者、良性前列腺炎(BPH)患者和PC患者外周血DD3 mRNA.结果 所建立的SYBR Green实时RT-PCR方法最少可检测到10拷贝的核酸,在每反应108-103copies/ml范围内,CT值与起始模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为-0.992～-1;扩增后仅有的熔解曲线特异峰显示很好的特异性;不同标准点批间变异系数范围为6.1%-13.7%(n=5).结论 基于双链嵌合染料SYBR Green建立的RT-PCR定量检测DD3 mRNA方法具有敏感性高、线性检测范围广、特异性强、重复性较好的特点;PC患者外周血中可检测到DD3 mRNA表达.
目的 建立一種新的方法定量檢測前列腺癌(PC)患者外週血DD3mRNA方法擴增LNCaP細胞株暘性錶達的DD3mRNA,併以其擴增產物為外標準,通過優選引物及優化PCR的各項參數,建立瞭SYBR Green實時RT-PCR定量檢測PC患者外週血DD3 mRNA的方法,併以此方法檢測瞭健康男性誌願者、良性前列腺炎(BPH)患者和PC患者外週血DD3 mRNA.結果 所建立的SYBR Green實時RT-PCR方法最少可檢測到10拷貝的覈痠,在每反應108-103copies/ml範圍內,CT值與起始模闆濃度具有良好的線性關繫,相關繫數為-0.992～-1;擴增後僅有的鎔解麯線特異峰顯示很好的特異性;不同標準點批間變異繫數範圍為6.1%-13.7%(n=5).結論 基于雙鏈嵌閤染料SYBR Green建立的RT-PCR定量檢測DD3 mRNA方法具有敏感性高、線性檢測範圍廣、特異性彊、重複性較好的特點;PC患者外週血中可檢測到DD3 mRNA錶達.
목적 건립일충신적방법정량검측전렬선암(PC)환자외주혈DD3mRNA방법확증LNCaP세포주양성표체적DD3mRNA,병이기확증산물위외표준,통과우선인물급우화PCR적각항삼수,건립료SYBR Green실시RT-PCR정량검측PC환자외주혈DD3 mRNA적방법,병이차방법검측료건강남성지원자、량성전렬선염(BPH)환자화PC환자외주혈DD3 mRNA.결과 소건립적SYBR Green실시RT-PCR방법최소가검측도10고패적핵산,재매반응108-103copies/ml범위내,CT치여기시모판농도구유량호적선성관계,상관계수위-0.992～-1;확증후부유적용해곡선특이봉현시흔호적특이성;불동표준점비간변이계수범위위6.1%-13.7%(n=5).결론 기우쌍련감합염료SYBR Green건립적RT-PCR정량검측DD3 mRNA방법구유민감성고、선성검측범위엄、특이성강、중복성교호적특점;PC환자외주혈중가검측도DD3 mRNA표체.
