实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2007年
19期
2966-2968
,共3页
李卫滨%兰小鹏%杨湘越%吴文冰
李衛濱%蘭小鵬%楊湘越%吳文冰
리위빈%란소붕%양상월%오문빙
环孢菌素%适体%随机ssDNA文库
環孢菌素%適體%隨機ssDNA文庫
배포균소%괄체%수궤ssDNA문고
目的:运用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术,筛选并鉴定环孢霉素A(CsA)特异性的适体.方法:合成一个全长78个核苷酸中间含35个随机序列的随机单链寡核苷酸序列(ssDNA)文库,通过SELEX方法,即以磁珠作为筛选介质,利用生物素-链亲和素-辣根过氧化物酶系统检测每轮ssDNA文库与CsA的亲和力,筛选针对CsA的适体,将最后一轮筛选产物克隆测序并运用相关软件进行一级结构和二级结构分析.结果:经过10轮的筛选,ssDNA文库与CsA的亲和力呈上升趋势,随机挑选的19个克隆适体根据一级结构的同源性可分为5个家族,二级结构预测以茎环(发夹)为主.结论:我们通过改良SELEX方法筛选得到了CsA特异性的适体.
目的:運用指數富集的配體繫統進化(SELEX)技術,篩選併鑒定環孢黴素A(CsA)特異性的適體.方法:閤成一箇全長78箇覈苷痠中間含35箇隨機序列的隨機單鏈寡覈苷痠序列(ssDNA)文庫,通過SELEX方法,即以磁珠作為篩選介質,利用生物素-鏈親和素-辣根過氧化物酶繫統檢測每輪ssDNA文庫與CsA的親和力,篩選針對CsA的適體,將最後一輪篩選產物剋隆測序併運用相關軟件進行一級結構和二級結構分析.結果:經過10輪的篩選,ssDNA文庫與CsA的親和力呈上升趨勢,隨機挑選的19箇剋隆適體根據一級結構的同源性可分為5箇傢族,二級結構預測以莖環(髮夾)為主.結論:我們通過改良SELEX方法篩選得到瞭CsA特異性的適體.
목적:운용지수부집적배체계통진화(SELEX)기술,사선병감정배포매소A(CsA)특이성적괄체.방법:합성일개전장78개핵감산중간함35개수궤서렬적수궤단련과핵감산서렬(ssDNA)문고,통과SELEX방법,즉이자주작위사선개질,이용생물소-련친화소-랄근과양화물매계통검측매륜ssDNA문고여CsA적친화력,사선침대CsA적괄체,장최후일륜사선산물극륭측서병운용상관연건진행일급결구화이급결구분석.결과:경과10륜적사선,ssDNA문고여CsA적친화력정상승추세,수궤도선적19개극륭괄체근거일급결구적동원성가분위5개가족,이급결구예측이경배(발협)위주.결론:아문통과개량SELEX방법사선득도료CsA특이성적괄체.