中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
8期
7-13
,共7页
姜立%马文丽%李晋%彭翼飞%徐兵%郑文岭
薑立%馬文麗%李晉%彭翼飛%徐兵%鄭文嶺
강립%마문려%리진%팽익비%서병%정문령
抗酶%细胞增殖%细胞周期%凋亡
抗酶%細胞增殖%細胞週期%凋亡
항매%세포증식%세포주기%조망
目的: 研究鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白对人红白血病K562细胞增殖、三氧化二砷( As2O3)诱导凋亡时的影响.方法: 定点突变技术构建缺失frameshift位点的pEGFP-N1-AZ1-mutation重组表达载体.脂质体法转染K562细胞,通过G418筛选获得稳定表达antizyme1的K562pAZ1m细胞系.采用不同浓度的As2O3处理细胞,通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期及凋亡变化.并通过RT-PCR方法检测antizyme1转染对cyclin D1和survivin基因表达的影响.结果:获得稳定表达antizyme1的K562pAZ1m细胞株后,其增殖能力明显减慢.cyclin D1基因表达降低,细胞主要停滞于G0/G1期.在 As2O3的诱导作用下,细胞凋亡增多,survivin基因表达降低.结论:AZ1基因能够抑制K562细胞增殖,通过对cyclin D1的负调控使细胞周期停滞于G0/G1期.并可能通过下调survivin表达来加强 As2O3对其的诱导凋亡作用.
目的: 研究鳥氨痠脫羧酶抗酶蛋白對人紅白血病K562細胞增殖、三氧化二砷( As2O3)誘導凋亡時的影響.方法: 定點突變技術構建缺失frameshift位點的pEGFP-N1-AZ1-mutation重組錶達載體.脂質體法轉染K562細胞,通過G418篩選穫得穩定錶達antizyme1的K562pAZ1m細胞繫.採用不同濃度的As2O3處理細胞,通過MTT法檢測細胞增殖,流式細胞術分析細胞週期及凋亡變化.併通過RT-PCR方法檢測antizyme1轉染對cyclin D1和survivin基因錶達的影響.結果:穫得穩定錶達antizyme1的K562pAZ1m細胞株後,其增殖能力明顯減慢.cyclin D1基因錶達降低,細胞主要停滯于G0/G1期.在 As2O3的誘導作用下,細胞凋亡增多,survivin基因錶達降低.結論:AZ1基因能夠抑製K562細胞增殖,通過對cyclin D1的負調控使細胞週期停滯于G0/G1期.併可能通過下調survivin錶達來加彊 As2O3對其的誘導凋亡作用.
목적: 연구조안산탈최매항매단백대인홍백혈병K562세포증식、삼양화이신( As2O3)유도조망시적영향.방법: 정점돌변기술구건결실frameshift위점적pEGFP-N1-AZ1-mutation중조표체재체.지질체법전염K562세포,통과G418사선획득은정표체antizyme1적K562pAZ1m세포계.채용불동농도적As2O3처리세포,통과MTT법검측세포증식,류식세포술분석세포주기급조망변화.병통과RT-PCR방법검측antizyme1전염대cyclin D1화survivin기인표체적영향.결과:획득은정표체antizyme1적K562pAZ1m세포주후,기증식능력명현감만.cyclin D1기인표체강저,세포주요정체우G0/G1기.재 As2O3적유도작용하,세포조망증다,survivin기인표체강저.결론:AZ1기인능구억제K562세포증식,통과대cyclin D1적부조공사세포주기정체우G0/G1기.병가능통과하조survivin표체래가강 As2O3대기적유도조망작용.
