水产学报
水產學報
수산학보
JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA
2007年
4期
431-436
,共6页
余来宁%危起伟%张繁荣%杨东%姚雁鸿%刘红艳
餘來寧%危起偉%張繁榮%楊東%姚雁鴻%劉紅豔
여래저%위기위%장번영%양동%요안홍%류홍염
中华鲟%胚胎细胞%冷冻保存%核移植
中華鱘%胚胎細胞%冷凍保存%覈移植
중화심%배태세포%냉동보존%핵이식
为了保存濒危鱼类中华鲟种质资源,对其囊胚细胞和原肠细胞进行了冷冻保存和核移植试验.用二甲亚砜(DMSO)、1,2-丙二醇(PG)、羟乙基淀粉(HES) 3种抗冻剂,配制4种冷冻保护液:CP1(12%D)、 CP2(10%P)、CP3(8%D+6%E)、 CP4(7%P+6%E),冷冻细胞存活率分别为47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%, CP4保存效果最好,说明添加非渗透型抗冻剂羟乙基淀粉能提高冷冻保存细胞的存活率.比较了两种冷冻方法, 发现细胞在-7 ℃平衡30 min之后直接投入液氮的一步冷冻降温法是可行的.对不同发育时期的胚胎细胞冷冻存活率进行了比较,结果表明原肠细胞冷冻存活率(64.4%±11.8%)明显比囊胚细胞的(57.1%±11.2%)高(P＜0.05).用冷冻复苏后的囊胚细胞和原肠细胞作供体,以中华鲟未受精卵作受体进行核移植,各移植了469和392枚卵,分别获得了5尾和2尾克隆鱼,核移植成功率分别为1.1%和0.5%.表明可通过冷冻保存胚胎细胞结合核移植技术保存鱼类种质资源.
為瞭保存瀕危魚類中華鱘種質資源,對其囊胚細胞和原腸細胞進行瞭冷凍保存和覈移植試驗.用二甲亞砜(DMSO)、1,2-丙二醇(PG)、羥乙基澱粉(HES) 3種抗凍劑,配製4種冷凍保護液:CP1(12%D)、 CP2(10%P)、CP3(8%D+6%E)、 CP4(7%P+6%E),冷凍細胞存活率分彆為47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%, CP4保存效果最好,說明添加非滲透型抗凍劑羥乙基澱粉能提高冷凍保存細胞的存活率.比較瞭兩種冷凍方法, 髮現細胞在-7 ℃平衡30 min之後直接投入液氮的一步冷凍降溫法是可行的.對不同髮育時期的胚胎細胞冷凍存活率進行瞭比較,結果錶明原腸細胞冷凍存活率(64.4%±11.8%)明顯比囊胚細胞的(57.1%±11.2%)高(P＜0.05).用冷凍複囌後的囊胚細胞和原腸細胞作供體,以中華鱘未受精卵作受體進行覈移植,各移植瞭469和392枚卵,分彆穫得瞭5尾和2尾剋隆魚,覈移植成功率分彆為1.1%和0.5%.錶明可通過冷凍保存胚胎細胞結閤覈移植技術保存魚類種質資源.
위료보존빈위어류중화심충질자원,대기낭배세포화원장세포진행료냉동보존화핵이식시험.용이갑아풍(DMSO)、1,2-병이순(PG)、간을기정분(HES) 3충항동제,배제4충냉동보호액:CP1(12%D)、 CP2(10%P)、CP3(8%D+6%E)、 CP4(7%P+6%E),냉동세포존활솔분별위47.4%±4.7%、64.4%±3.6%、54.7%±4.7%、76.7%±5.7%, CP4보존효과최호,설명첨가비삼투형항동제간을기정분능제고냉동보존세포적존활솔.비교료량충냉동방법, 발현세포재-7 ℃평형30 min지후직접투입액담적일보냉동강온법시가행적.대불동발육시기적배태세포냉동존활솔진행료비교,결과표명원장세포냉동존활솔(64.4%±11.8%)명현비낭배세포적(57.1%±11.2%)고(P＜0.05).용냉동복소후적낭배세포화원장세포작공체,이중화심미수정란작수체진행핵이식,각이식료469화392매란,분별획득료5미화2미극륭어,핵이식성공솔분별위1.1%화0.5%.표명가통과냉동보존배태세포결합핵이식기술보존어류충질자원.
