湖北大学学报（自然科学版）
湖北大學學報（自然科學版）
호북대학학보（자연과학판）
2007年
3期
290-293
,共4页
黄光瑞%田丽春%黄生平%蒋思婧%马立新
黃光瑞%田麗春%黃生平%蔣思婧%馬立新
황광서%전려춘%황생평%장사청%마립신
高比活植酸酶基因%毕赤酵母%密码子优化%高效表达
高比活植痠酶基因%畢赤酵母%密碼子優化%高效錶達
고비활식산매기인%필적효모%밀마자우화%고효표체
根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子使用偏爱性,对Escherichia coli来源的高比活植酸酶基因(appA)全面地进行密码子优化,人工合成了植酸酶基因(appA-P),并将该基因克隆到毕赤酵母诱导型分泌表达载体pHBM905A上,获得重组质粒pHBM905A-appA-P,通过PEG1000转化法将线性化的重组质粒转化毕赤酵母GS115菌株,筛选得到一个高效表达植酸酶的重组菌株GS115-appA-P,在25℃摇瓶培养168 h后酶活力达到422 U/mL,该植酸酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为4.5,在20～50 ℃、pH1.0～6.0范围内较稳定.
根據畢赤酵母(Pichia pastoris)密碼子使用偏愛性,對Escherichia coli來源的高比活植痠酶基因(appA)全麵地進行密碼子優化,人工閤成瞭植痠酶基因(appA-P),併將該基因剋隆到畢赤酵母誘導型分泌錶達載體pHBM905A上,穫得重組質粒pHBM905A-appA-P,通過PEG1000轉化法將線性化的重組質粒轉化畢赤酵母GS115菌株,篩選得到一箇高效錶達植痠酶的重組菌株GS115-appA-P,在25℃搖瓶培養168 h後酶活力達到422 U/mL,該植痠酶最適反應溫度為60℃,最適反應pH為4.5,在20～50 ℃、pH1.0～6.0範圍內較穩定.
근거필적효모(Pichia pastoris)밀마자사용편애성,대Escherichia coli래원적고비활식산매기인(appA)전면지진행밀마자우화,인공합성료식산매기인(appA-P),병장해기인극륭도필적효모유도형분비표체재체pHBM905A상,획득중조질립pHBM905A-appA-P,통과PEG1000전화법장선성화적중조질립전화필적효모GS115균주,사선득도일개고효표체식산매적중조균주GS115-appA-P,재25℃요병배양168 h후매활력체도422 U/mL,해식산매최괄반응온도위60℃,최괄반응pH위4.5,재20～50 ℃、pH1.0～6.0범위내교은정.
