第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2007年
9期
773-775
,共3页
于欣平%宋庆贺%侯立朝%杜可军%熊利泽%陈苏民%陈南春%代忠明
于訢平%宋慶賀%侯立朝%杜可軍%熊利澤%陳囌民%陳南春%代忠明
우흔평%송경하%후립조%두가군%웅리택%진소민%진남춘%대충명
脂多糖类%人脂多糖应答基因%人脂多糖应答蛋白%抗体制备
脂多糖類%人脂多糖應答基因%人脂多糖應答蛋白%抗體製備
지다당류%인지다당응답기인%인지다당응답단백%항체제비
目的:制备人Lrp蛋白多克隆抗体. 方法:克隆全长lrp-cDNA编码序列并进行原核表达与鉴定. 用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化原核表达的全长Lrp蛋白,获得纯度较高的目的蛋白. 用纯化后蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并吸附去除非特异性反应成分. 结果:Western印迹结果表明,纯化前后的抗血清在69 ku处均检测到目的蛋白条带,说明吸附纯化后的抗体可以与Lrp蛋白特异结合. 而纯化后抗体Western印迹结果目的条带只有一条,说明吸附纯化后得到高特异性抗血清,其免疫印迹的效价在10-6以上,有较高免疫印迹滴度. 结论:成功制备了高效价高特异性的兔抗人Lrp蛋白的多克隆抗体,为Lrp功能的进一步研究提供了重要的实验工具.
目的:製備人Lrp蛋白多剋隆抗體. 方法:剋隆全長lrp-cDNA編碼序列併進行原覈錶達與鑒定. 用鎳離子螯閤柱(Ni-NTA)純化原覈錶達的全長Lrp蛋白,穫得純度較高的目的蛋白. 用純化後蛋白免疫新西蘭大白兔製備多剋隆抗體併吸附去除非特異性反應成分. 結果:Western印跡結果錶明,純化前後的抗血清在69 ku處均檢測到目的蛋白條帶,說明吸附純化後的抗體可以與Lrp蛋白特異結閤. 而純化後抗體Western印跡結果目的條帶隻有一條,說明吸附純化後得到高特異性抗血清,其免疫印跡的效價在10-6以上,有較高免疫印跡滴度. 結論:成功製備瞭高效價高特異性的兔抗人Lrp蛋白的多剋隆抗體,為Lrp功能的進一步研究提供瞭重要的實驗工具.
목적:제비인Lrp단백다극륭항체. 방법:극륭전장lrp-cDNA편마서렬병진행원핵표체여감정. 용얼리자오합주(Ni-NTA)순화원핵표체적전장Lrp단백,획득순도교고적목적단백. 용순화후단백면역신서란대백토제비다극륭항체병흡부거제비특이성반응성분. 결과:Western인적결과표명,순화전후적항혈청재69 ku처균검측도목적단백조대,설명흡부순화후적항체가이여Lrp단백특이결합. 이순화후항체Western인적결과목적조대지유일조,설명흡부순화후득도고특이성항혈청,기면역인적적효개재10-6이상,유교고면역인적적도. 결론:성공제비료고효개고특이성적토항인Lrp단백적다극륭항체,위Lrp공능적진일보연구제공료중요적실험공구.
