科技导报
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과기도보
SCIENCE & TECHNOLOGY REVIEW
2006年
3期
18-20
,共3页
李莉萍%韦平%韦天超%滕丽琼%韦信贤%李康然
李莉萍%韋平%韋天超%滕麗瓊%韋信賢%李康然
리리평%위평%위천초%등려경%위신현%리강연
禽流感%病毒分离鉴定%反转录酶-聚合酶链式反应%间接免疫荧光技术%亚型鉴定
禽流感%病毒分離鑒定%反轉錄酶-聚閤酶鏈式反應%間接免疫熒光技術%亞型鑒定
금류감%병독분리감정%반전록매-취합매련식반응%간접면역형광기술%아형감정
对分别应用病毒分离鉴定、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光(IFA)3种方法对病料组织中的禽流感病毒(AIV)进行检测与比较研究.结果显示:经鸡胚尿囊腔接种分离到的病毒,通过用禽流感病毒H5、H9亚型单克隆抗体所进行的血凝(HA)和血凝抑制试验(H1),鉴定为AIV H5亚型毒株;应用RT-PCR技术直接对病料组织抽提的RNA样品进行检测,从病料组织能扩增出大小为229bp的AIV通用目的片段和大小为380bp的H5亚型特异性片段;取病料组织的过滤液接种狗肾上皮细胞(MDCK)单层,24h后用H5亚型AIV特异性的单克隆抗体进行间接免疫荧光试验,结果在细胞核、细胞质内观察到特异性的荧光.研究的结果表明,3种技术都可对病料样品中的AIV进行检测,而RT-PCR和IFA两种方法还可直接对病料样品中的病毒进行亚型的鉴定.相对而言,后两者具有更快速、更敏感、操作更简便的特点.
對分彆應用病毒分離鑒定、反轉錄-聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)、間接免疫熒光(IFA)3種方法對病料組織中的禽流感病毒(AIV)進行檢測與比較研究.結果顯示:經鷄胚尿囊腔接種分離到的病毒,通過用禽流感病毒H5、H9亞型單剋隆抗體所進行的血凝(HA)和血凝抑製試驗(H1),鑒定為AIV H5亞型毒株;應用RT-PCR技術直接對病料組織抽提的RNA樣品進行檢測,從病料組織能擴增齣大小為229bp的AIV通用目的片段和大小為380bp的H5亞型特異性片段;取病料組織的過濾液接種狗腎上皮細胞(MDCK)單層,24h後用H5亞型AIV特異性的單剋隆抗體進行間接免疫熒光試驗,結果在細胞覈、細胞質內觀察到特異性的熒光.研究的結果錶明,3種技術都可對病料樣品中的AIV進行檢測,而RT-PCR和IFA兩種方法還可直接對病料樣品中的病毒進行亞型的鑒定.相對而言,後兩者具有更快速、更敏感、操作更簡便的特點.
대분별응용병독분리감정、반전록-취합매련식반응(RT-PCR)、간접면역형광(IFA)3충방법대병료조직중적금류감병독(AIV)진행검측여비교연구.결과현시:경계배뇨낭강접충분리도적병독,통과용금류감병독H5、H9아형단극륭항체소진행적혈응(HA)화혈응억제시험(H1),감정위AIV H5아형독주;응용RT-PCR기술직접대병료조직추제적RNA양품진행검측,종병료조직능확증출대소위229bp적AIV통용목적편단화대소위380bp적H5아형특이성편단;취병료조직적과려액접충구신상피세포(MDCK)단층,24h후용H5아형AIV특이성적단극륭항체진행간접면역형광시험,결과재세포핵、세포질내관찰도특이성적형광.연구적결과표명,3충기술도가대병료양품중적AIV진행검측,이RT-PCR화IFA량충방법환가직접대병료양품중적병독진행아형적감정.상대이언,후량자구유경쾌속、경민감、조작경간편적특점.
