实用癌症杂志
實用癌癥雜誌
실용암증잡지
THE PRACTICAL JOURNAL OF CANCER
2006年
2期
120-122,129
,共4页
卓建新%蒋磊%陈日曙%李继承
卓建新%蔣磊%陳日曙%李繼承
탁건신%장뢰%진일서%리계승
基础医学%cyclin D1%siRNA%shRNA
基礎醫學%cyclin D1%siRNA%shRNA
기출의학%cyclin D1%siRNA%shRNA
目的研究siRNA (small interfering RNA)对cyclin D1基因表达的抑制作用及shRNA表达质粒的构建.方法化学合成针对cyclin D1基因的siRNA,转染MCF-7细胞株;分别应用荧光定量PCR和免疫印迹检测cyclin D1 mRNA和蛋白的表达;合成特异性cyclin D1的RNA干扰寡核苷酸序列,采用克隆技术,将其插人Psilencer2.1-U6质粒表达载体,构建cyclin D1 shRNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体.结果化学合成的siRNA转染MCF-7细胞,48 h 后cyclin D1基因和蛋白表达都明显降低;构建特异性针对cyclin D1的shRNA 表达质粒,酶切和测序结果显示,siRNA片段已成功插入Psilencer2.1-U6载体,载体构建成功.结论 siRNA可以有效抑制MCF-7细胞株中cyclin D1的表达,并成功构建其shRNA表达质粒.
目的研究siRNA (small interfering RNA)對cyclin D1基因錶達的抑製作用及shRNA錶達質粒的構建.方法化學閤成針對cyclin D1基因的siRNA,轉染MCF-7細胞株;分彆應用熒光定量PCR和免疫印跡檢測cyclin D1 mRNA和蛋白的錶達;閤成特異性cyclin D1的RNA榦擾寡覈苷痠序列,採用剋隆技術,將其插人Psilencer2.1-U6質粒錶達載體,構建cyclin D1 shRNA(small hairpin RNA,shRNA)錶達載體.結果化學閤成的siRNA轉染MCF-7細胞,48 h 後cyclin D1基因和蛋白錶達都明顯降低;構建特異性針對cyclin D1的shRNA 錶達質粒,酶切和測序結果顯示,siRNA片段已成功插入Psilencer2.1-U6載體,載體構建成功.結論 siRNA可以有效抑製MCF-7細胞株中cyclin D1的錶達,併成功構建其shRNA錶達質粒.
목적연구siRNA (small interfering RNA)대cyclin D1기인표체적억제작용급shRNA표체질립적구건.방법화학합성침대cyclin D1기인적siRNA,전염MCF-7세포주;분별응용형광정량PCR화면역인적검측cyclin D1 mRNA화단백적표체;합성특이성cyclin D1적RNA간우과핵감산서렬,채용극륭기술,장기삽인Psilencer2.1-U6질립표체재체,구건cyclin D1 shRNA(small hairpin RNA,shRNA)표체재체.결과화학합성적siRNA전염MCF-7세포,48 h 후cyclin D1기인화단백표체도명현강저;구건특이성침대cyclin D1적shRNA 표체질립,매절화측서결과현시,siRNA편단이성공삽입Psilencer2.1-U6재체,재체구건성공.결론 siRNA가이유효억제MCF-7세포주중cyclin D1적표체,병성공구건기shRNA표체질립.
