应用与环境生物学报
應用與環境生物學報
응용여배경생물학보
CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY
2006年
1期
99-103
,共5页
熊顺子%张学礼%陈慕云%诸晖%冯玉%周志华%赵立平
熊順子%張學禮%陳慕雲%諸暉%馮玉%週誌華%趙立平
웅순자%장학례%진모운%제휘%풍옥%주지화%조립평
ERIC-PCR%LmPH%16S rDNA%悬浮污泥%降酚菌
ERIC-PCR%LmPH%16S rDNA%懸浮汙泥%降酚菌
ERIC-PCR%LmPH%16S rDNA%현부오니%강분균
用3种不含苯酚的培养基(YPG、10%YPG和LB)从上海焦化厂废水处理系统(A2/O法)好氧池的悬浮污泥分离到24株降酚菌株.通过16S rDNA PCR扩增产物的限制性酶切分析(amplified ribosomal DNA restriction andysis,ARDRA)、ERIC-PCR指纹图谱分析、多组分苯酚羟化酶大亚基(the largest subunit ofthe multi-component phenol hydroxylase,LmPH)基因的PCR扩增及16S rRNA基因测序的方法对这些降酚菌株进行表征.通过ARDRA分型,将这24株降酚菌株分为8个类型;利用ERIC-PCR可以将这24个菌株分为17种类型,说明同一ARDRA类型内菌株具有多样性.对17个ERIC类型代表菌株的16S rDNA扩增产物进行克隆并测序,测序结果在GenBank和RDP中进行比对.结果表明,与这17个代表菌株同源性最高的菌中,有6株是未见报道具有降酚功能的菌株.在这24株降酚菌中,有19株在苯酚含量为200mg/L的MP培养基中培养5 d,苯酚降解率为20%左右,其余5株苯酚降解率达到100%,且均属于Rhodococcus属.本研究在降酚菌生物多样性上作了有益的探索.图2表1参20
用3種不含苯酚的培養基(YPG、10%YPG和LB)從上海焦化廠廢水處理繫統(A2/O法)好氧池的懸浮汙泥分離到24株降酚菌株.通過16S rDNA PCR擴增產物的限製性酶切分析(amplified ribosomal DNA restriction andysis,ARDRA)、ERIC-PCR指紋圖譜分析、多組分苯酚羥化酶大亞基(the largest subunit ofthe multi-component phenol hydroxylase,LmPH)基因的PCR擴增及16S rRNA基因測序的方法對這些降酚菌株進行錶徵.通過ARDRA分型,將這24株降酚菌株分為8箇類型;利用ERIC-PCR可以將這24箇菌株分為17種類型,說明同一ARDRA類型內菌株具有多樣性.對17箇ERIC類型代錶菌株的16S rDNA擴增產物進行剋隆併測序,測序結果在GenBank和RDP中進行比對.結果錶明,與這17箇代錶菌株同源性最高的菌中,有6株是未見報道具有降酚功能的菌株.在這24株降酚菌中,有19株在苯酚含量為200mg/L的MP培養基中培養5 d,苯酚降解率為20%左右,其餘5株苯酚降解率達到100%,且均屬于Rhodococcus屬.本研究在降酚菌生物多樣性上作瞭有益的探索.圖2錶1參20
용3충불함분분적배양기(YPG、10%YPG화LB)종상해초화엄폐수처리계통(A2/O법)호양지적현부오니분리도24주강분균주.통과16S rDNA PCR확증산물적한제성매절분석(amplified ribosomal DNA restriction andysis,ARDRA)、ERIC-PCR지문도보분석、다조분분분간화매대아기(the largest subunit ofthe multi-component phenol hydroxylase,LmPH)기인적PCR확증급16S rRNA기인측서적방법대저사강분균주진행표정.통과ARDRA분형,장저24주강분균주분위8개류형;이용ERIC-PCR가이장저24개균주분위17충류형,설명동일ARDRA류형내균주구유다양성.대17개ERIC류형대표균주적16S rDNA확증산물진행극륭병측서,측서결과재GenBank화RDP중진행비대.결과표명,여저17개대표균주동원성최고적균중,유6주시미견보도구유강분공능적균주.재저24주강분균중,유19주재분분함량위200mg/L적MP배양기중배양5 d,분분강해솔위20%좌우,기여5주분분강해솔체도100%,차균속우Rhodococcus속.본연구재강분균생물다양성상작료유익적탐색.도2표1삼20