天津医科大学学报
天津醫科大學學報
천진의과대학학보
JOURNAL OF TIANJIN MEDICAL UNIVERSITY
2006年
1期
1-3,13
,共4页
致肾盂肾炎大肠埃希菌%抑制性消减杂交%聚合酶链式反应
緻腎盂腎炎大腸埃希菌%抑製性消減雜交%聚閤酶鏈式反應
치신우신염대장애희균%억제성소감잡교%취합매련식반응
目的:应用抑制性消减杂交技术,构建致肾盂肾炎大肠埃希菌132株(UPEC132)与已完成基因组测序的非致病性大肠埃希菌标准株MG1655的基因组DNA消减文库.方法:分别提取UPEC132与MG1655的基因组DNA,经Rsa I酶切成为大小200～800bp的片段,一部分与接头连接作为tester,和未与接头连接的酶切片段(driver)进行2次消减杂交及2次抑制性PCR后将产物与pMD18-T载体连接构建DNA消减文库,并转化给大肠埃希菌TOP10构建消减文库.结果:文库扩增后得到139个克隆,经PCR法快速测定,均得到200～800 bp的插入片段.结论:所构建的基因组DNA消减文库为进一步筛选UPEC132中与致病相关基因奠定了基础.
目的:應用抑製性消減雜交技術,構建緻腎盂腎炎大腸埃希菌132株(UPEC132)與已完成基因組測序的非緻病性大腸埃希菌標準株MG1655的基因組DNA消減文庫.方法:分彆提取UPEC132與MG1655的基因組DNA,經Rsa I酶切成為大小200～800bp的片段,一部分與接頭連接作為tester,和未與接頭連接的酶切片段(driver)進行2次消減雜交及2次抑製性PCR後將產物與pMD18-T載體連接構建DNA消減文庫,併轉化給大腸埃希菌TOP10構建消減文庫.結果:文庫擴增後得到139箇剋隆,經PCR法快速測定,均得到200～800 bp的插入片段.結論:所構建的基因組DNA消減文庫為進一步篩選UPEC132中與緻病相關基因奠定瞭基礎.
목적:응용억제성소감잡교기술,구건치신우신염대장애희균132주(UPEC132)여이완성기인조측서적비치병성대장애희균표준주MG1655적기인조DNA소감문고.방법:분별제취UPEC132여MG1655적기인조DNA,경Rsa I매절성위대소200～800bp적편단,일부분여접두련접작위tester,화미여접두련접적매절편단(driver)진행2차소감잡교급2차억제성PCR후장산물여pMD18-T재체련접구건DNA소감문고,병전화급대장애희균TOP10구건소감문고.결과:문고확증후득도139개극륭,경PCR법쾌속측정,균득도200～800 bp적삽입편단.결론:소구건적기인조DNA소감문고위진일보사선UPEC132중여치병상관기인전정료기출.
