中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2005年
11期
7-11
,共5页
狄春红%杨磊%和桂芬%仙玲%谭晓华%吴奇涵%季朝能%顾少华
狄春紅%楊磊%和桂芬%仙玲%譚曉華%吳奇涵%季朝能%顧少華
적춘홍%양뢰%화계분%선령%담효화%오기함%계조능%고소화
As2O3%NB4细胞%细胞凋亡和周期基因芯片%基因表达谱
As2O3%NB4細胞%細胞凋亡和週期基因芯片%基因錶達譜
As2O3%NB4세포%세포조망화주기기인심편%기인표체보
目的:利用细胞凋亡和周期基因芯片研究As2O3作用前后NB4细胞基因表达谱的差异性,寻找As2O3诱导NB4细胞凋亡的相关基因并分析其可能机制.方法:流式细胞仪检测细胞凋亡率,抽提对照及诱导组细胞的mRNA,通过逆转录将As2O3处理前后的NB4细胞cDNA进行生物素标记,用含269个目的基因的细胞凋亡和周期基因芯片进行杂交,GEArray软件分析,筛选出As2O3诱导前后表达有差异的基因.芯片结果用荧光定量聚合酶链反应(real time polymerasechain reaction)进行验证.结果:筛选出As2O3作用前后表达有差异的基因共100条(占芯片基因总数的37.2%),其中97条(97/100,97%)基因表达上调,3条(3/100,3%)基因表达下调.表达上调的基因主要包括肿瘤坏死因子配体和受体家族、bcl-2家族、半胱氨酸家族、DNA损伤检测和P53途径以及细胞分裂周期蛋白和激酶等基因.结论:As2O3主要通过上调促凋亡基因表达来诱导NB4细胞凋亡,其中TNFSF15、Apaf-1、Caspase-3和p16等基因可能参与As2O3诱导的NB4细胞凋亡,As2O3诱导NB4细胞凋亡的可能机制主要涉及TNF途径、线粒体途径、Caspase途径、细胞周期抑制途径和P53途径等.
目的:利用細胞凋亡和週期基因芯片研究As2O3作用前後NB4細胞基因錶達譜的差異性,尋找As2O3誘導NB4細胞凋亡的相關基因併分析其可能機製.方法:流式細胞儀檢測細胞凋亡率,抽提對照及誘導組細胞的mRNA,通過逆轉錄將As2O3處理前後的NB4細胞cDNA進行生物素標記,用含269箇目的基因的細胞凋亡和週期基因芯片進行雜交,GEArray軟件分析,篩選齣As2O3誘導前後錶達有差異的基因.芯片結果用熒光定量聚閤酶鏈反應(real time polymerasechain reaction)進行驗證.結果:篩選齣As2O3作用前後錶達有差異的基因共100條(佔芯片基因總數的37.2%),其中97條(97/100,97%)基因錶達上調,3條(3/100,3%)基因錶達下調.錶達上調的基因主要包括腫瘤壞死因子配體和受體傢族、bcl-2傢族、半胱氨痠傢族、DNA損傷檢測和P53途徑以及細胞分裂週期蛋白和激酶等基因.結論:As2O3主要通過上調促凋亡基因錶達來誘導NB4細胞凋亡,其中TNFSF15、Apaf-1、Caspase-3和p16等基因可能參與As2O3誘導的NB4細胞凋亡,As2O3誘導NB4細胞凋亡的可能機製主要涉及TNF途徑、線粒體途徑、Caspase途徑、細胞週期抑製途徑和P53途徑等.
목적:이용세포조망화주기기인심편연구As2O3작용전후NB4세포기인표체보적차이성,심조As2O3유도NB4세포조망적상관기인병분석기가능궤제.방법:류식세포의검측세포조망솔,추제대조급유도조세포적mRNA,통과역전록장As2O3처리전후적NB4세포cDNA진행생물소표기,용함269개목적기인적세포조망화주기기인심편진행잡교,GEArray연건분석,사선출As2O3유도전후표체유차이적기인.심편결과용형광정량취합매련반응(real time polymerasechain reaction)진행험증.결과:사선출As2O3작용전후표체유차이적기인공100조(점심편기인총수적37.2%),기중97조(97/100,97%)기인표체상조,3조(3/100,3%)기인표체하조.표체상조적기인주요포괄종류배사인자배체화수체가족、bcl-2가족、반광안산가족、DNA손상검측화P53도경이급세포분렬주기단백화격매등기인.결론:As2O3주요통과상조촉조망기인표체래유도NB4세포조망,기중TNFSF15、Apaf-1、Caspase-3화p16등기인가능삼여As2O3유도적NB4세포조망,As2O3유도NB4세포조망적가능궤제주요섭급TNF도경、선립체도경、Caspase도경、세포주기억제도경화P53도경등.
