苏州大学学报（医学版）
囌州大學學報（醫學版）
소주대학학보（의학판）
SUZHOU UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCE
2005年
3期
376-378,394
,共4页
周璇%黄勇%郑璐%庄羽美%周桓%张学光
週璇%黃勇%鄭璐%莊羽美%週桓%張學光
주선%황용%정로%장우미%주환%장학광
CD40配体%大肠杆菌%表达
CD40配體%大腸桿菌%錶達
CD40배체%대장간균%표체
目的克隆sCD40L功能性片段(E107-L261)基因并在大肠杆菌体系进行表达.方法从CD40L胞外段全长基因通过PCR方法扩增出sCD40L功能性片段(E107-L261)的基因,并在其N端融合6个组氨酸(His);经PCR、酶以及DNA测序证实;将融合得到的sCD40L基因插入pET30a表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达体系进行诱导表达.结果构建了pET30a-sCD40L原核表达载体;将转化菌BL21(DE3)诱导表达后经SDS-PAGE电泳以及Western Blotting鉴定显示在18kd处有sCD40L功能性片段(E107-L261)的高效表达.结论sCD40L功能性片段基因的克隆及其表达为进一步研制其同源三聚体形式的功能性重组蛋白奠定了基础.
目的剋隆sCD40L功能性片段(E107-L261)基因併在大腸桿菌體繫進行錶達.方法從CD40L胞外段全長基因通過PCR方法擴增齣sCD40L功能性片段(E107-L261)的基因,併在其N耑融閤6箇組氨痠(His);經PCR、酶以及DNA測序證實;將融閤得到的sCD40L基因插入pET30a錶達載體,轉化大腸桿菌BL21(DE3)錶達體繫進行誘導錶達.結果構建瞭pET30a-sCD40L原覈錶達載體;將轉化菌BL21(DE3)誘導錶達後經SDS-PAGE電泳以及Western Blotting鑒定顯示在18kd處有sCD40L功能性片段(E107-L261)的高效錶達.結論sCD40L功能性片段基因的剋隆及其錶達為進一步研製其同源三聚體形式的功能性重組蛋白奠定瞭基礎.
목적극륭sCD40L공능성편단(E107-L261)기인병재대장간균체계진행표체.방법종CD40L포외단전장기인통과PCR방법확증출sCD40L공능성편단(E107-L261)적기인,병재기N단융합6개조안산(His);경PCR、매이급DNA측서증실;장융합득도적sCD40L기인삽입pET30a표체재체,전화대장간균BL21(DE3)표체체계진행유도표체.결과구건료pET30a-sCD40L원핵표체재체;장전화균BL21(DE3)유도표체후경SDS-PAGE전영이급Western Blotting감정현시재18kd처유sCD40L공능성편단(E107-L261)적고효표체.결론sCD40L공능성편단기인적극륭급기표체위진일보연제기동원삼취체형식적공능성중조단백전정료기출.
