中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2004年
2期
88-91
,共4页
殷晓雪%陈仲强%郭昭庆%马庆军%党耕町
慇曉雪%陳仲彊%郭昭慶%馬慶軍%黨耕町
은효설%진중강%곽소경%마경군%당경정
组织工程骨%骨髓间充质干细胞%成骨诱导%成骨分化
組織工程骨%骨髓間充質榦細胞%成骨誘導%成骨分化
조직공정골%골수간충질간세포%성골유도%성골분화
目的探讨将成人骨髓间充质干细胞(MSCs)定向诱导分化为成骨细胞的方法,并对所诱导细胞的成骨特性进行鉴定. 方法分离人骨髓,梯度离心并结合全骨髓法进行培养,培养基中添加成骨诱导剂地塞米松、β-甘油磷酸钠及抗坏血酸.贴壁细胞传代,取第3代细胞鉴定其成骨特性;在倒置相差显微镜下观察细胞形态,钙-钴法染色检测碱性磷酸酶(ALP)表达,免疫组织化学检测Ⅰ型胶原表达,原位杂交检测骨连接素(ON)、骨桥素(OP)表达,Von Kossa 染色检测钙结节形成. 结果第3代人MSCs呈典型的成骨细胞形态,可连续传代10次;ALP染色阳性率达85%;Ⅰ型胶原、ON和OP表达阳性;Von Kossa 染色可见钙结节形成. 结论成功地将人MSCs诱导分化为成骨细胞,所诱导的细胞具有典型的成骨细胞特性.
目的探討將成人骨髓間充質榦細胞(MSCs)定嚮誘導分化為成骨細胞的方法,併對所誘導細胞的成骨特性進行鑒定. 方法分離人骨髓,梯度離心併結閤全骨髓法進行培養,培養基中添加成骨誘導劑地塞米鬆、β-甘油燐痠鈉及抗壞血痠.貼壁細胞傳代,取第3代細胞鑒定其成骨特性;在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態,鈣-鈷法染色檢測堿性燐痠酶(ALP)錶達,免疫組織化學檢測Ⅰ型膠原錶達,原位雜交檢測骨連接素(ON)、骨橋素(OP)錶達,Von Kossa 染色檢測鈣結節形成. 結果第3代人MSCs呈典型的成骨細胞形態,可連續傳代10次;ALP染色暘性率達85%;Ⅰ型膠原、ON和OP錶達暘性;Von Kossa 染色可見鈣結節形成. 結論成功地將人MSCs誘導分化為成骨細胞,所誘導的細胞具有典型的成骨細胞特性.
목적탐토장성인골수간충질간세포(MSCs)정향유도분화위성골세포적방법,병대소유도세포적성골특성진행감정. 방법분리인골수,제도리심병결합전골수법진행배양,배양기중첨가성골유도제지새미송、β-감유린산납급항배혈산.첩벽세포전대,취제3대세포감정기성골특성;재도치상차현미경하관찰세포형태,개-고법염색검측감성린산매(ALP)표체,면역조직화학검측Ⅰ형효원표체,원위잡교검측골련접소(ON)、골교소(OP)표체,Von Kossa 염색검측개결절형성. 결과제3대인MSCs정전형적성골세포형태,가련속전대10차;ALP염색양성솔체85%;Ⅰ형효원、ON화OP표체양성;Von Kossa 염색가견개결절형성. 결론성공지장인MSCs유도분화위성골세포,소유도적세포구유전형적성골세포특성.
