中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2001年
4期
197-199
,共3页
曾星%梅玉屏%杨明%黄羽%谭敏
曾星%梅玉屏%楊明%黃羽%譚敏
증성%매옥병%양명%황우%담민
绿色荧光蛋白%白介素-2%重组卡介菌
綠色熒光蛋白%白介素-2%重組卡介菌
록색형광단백%백개소-2%중조잡개균
目的构建能复合表达绿色荧光蛋白和白介素-2重组卡介菌(rBCG-GFP-IL-2).方法采用基因工程技术构建pDmGFP-IL-2重组穿梭质粒,用电穿孔法将重组质粒pDmGFP-IL-2转化大肠杆菌和卡介菌中,采用限制酶切,荧光显微镜下观察及PCB方法鉴定pDMGFP-IL-2和rBCG-GFP-IL-2.结果琼脂糖凝胶电泳结果显示pDmGFP-IL-2质粒的限制酶切条带,PCR法检测重组BCG菌株可见明显IL-2片段扩增条带约0.3kb,rBCG-GFP-IL-2液体培养菌液在长波紫外线的照射下,发出明亮的绿色荧光,小鼠皮下接种rBCGGFP-IL-21周后,取组织冰冻切片在荧光显微镜下可见绿色荧光.结论成功构建了重组质粒pDMGFP-IL-2和共表达绿色荧光蛋白和白介素-2重组BCG(rBCG-GFP-IL-2).
目的構建能複閤錶達綠色熒光蛋白和白介素-2重組卡介菌(rBCG-GFP-IL-2).方法採用基因工程技術構建pDmGFP-IL-2重組穿梭質粒,用電穿孔法將重組質粒pDmGFP-IL-2轉化大腸桿菌和卡介菌中,採用限製酶切,熒光顯微鏡下觀察及PCB方法鑒定pDMGFP-IL-2和rBCG-GFP-IL-2.結果瓊脂糖凝膠電泳結果顯示pDmGFP-IL-2質粒的限製酶切條帶,PCR法檢測重組BCG菌株可見明顯IL-2片段擴增條帶約0.3kb,rBCG-GFP-IL-2液體培養菌液在長波紫外線的照射下,髮齣明亮的綠色熒光,小鼠皮下接種rBCGGFP-IL-21週後,取組織冰凍切片在熒光顯微鏡下可見綠色熒光.結論成功構建瞭重組質粒pDMGFP-IL-2和共錶達綠色熒光蛋白和白介素-2重組BCG(rBCG-GFP-IL-2).
목적구건능복합표체록색형광단백화백개소-2중조잡개균(rBCG-GFP-IL-2).방법채용기인공정기술구건pDmGFP-IL-2중조천사질립,용전천공법장중조질립pDmGFP-IL-2전화대장간균화잡개균중,채용한제매절,형광현미경하관찰급PCB방법감정pDMGFP-IL-2화rBCG-GFP-IL-2.결과경지당응효전영결과현시pDmGFP-IL-2질립적한제매절조대,PCR법검측중조BCG균주가견명현IL-2편단확증조대약0.3kb,rBCG-GFP-IL-2액체배양균액재장파자외선적조사하,발출명량적록색형광,소서피하접충rBCGGFP-IL-21주후,취조직빙동절편재형광현미경하가견록색형광.결론성공구건료중조질립pDMGFP-IL-2화공표체록색형광단백화백개소-2중조BCG(rBCG-GFP-IL-2).
