靶向表达TNFR75的逆转录病毒载体的构建及其产毒细胞系的建立
파향표체TNFR75적역전록병독재체적구건급기산독세포계적건립
Construction and Cell Line Selection of Target-expressing Retroviral Expression Vector Containing cDNA of TNFR75
  • 万方数据
    中国生物化学与分子生物学报 중국생물화학여분자생물학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
    2001年 2期 169-172 ,共4页

    孙晓文%刘丽%石缨%刘立忠%谢宝树%王烨%杨彦%冷爱军%曹颖

    손효문%류려%석영%류립충%사보수%왕엽%양언%랭애군%조영

    肿瘤坏死因子受体%逆转录病毒 腫瘤壞死因子受體%逆轉錄病毒
    종류배사인자수체%역전록병독
    将编码人TNFR75的cRNA与血管内皮细胞特异性启动子(KDRp)及缺失自身启动子的逆转录病毒载体pLXSN-D299重组.重组质粒pLXSN-D299-KDRp-TNFR75与脂质体共转染包装细胞PA317,经抗生素G418(600mg/L)筛选14 d,获得15个稳定的产病毒细胞克隆.将各细胞克隆分别扩大培养收集所产病毒上清,并感染NIH3T3细胞检测病毒滴度,其中1个克隆滴度达2×105CFU/ml.提取该克隆细胞总RNA进行RT-PCR分析,获得的cDNA片段长度与目的基因一致.结果提示,建立了TNFR75反转录病毒产毒细胞系.
    장편마인TNFR75적cRNA여혈관내피세포특이성계동자(KDRp)급결실자신계동자적역전록병독재체pLXSN-D299중조.중조질립pLXSN-D299-KDRp-TNFR75여지질체공전염포장세포PA317,경항생소G418(600mg/L)사선14 d,획득15개은정적산병독세포극륭.장각세포극륭분별확대배양수집소산병독상청,병감염NIH3T3세포검측병독적도,기중1개극륭적도체2×105CFU/ml.제취해극륭세포총RNA진행RT-PCR분석,획득적cDNA편단장도여목적기인일치.결과제시,건립료TNFR75반전록병독산독세포계.
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