北京大学学报(医学版)
北京大學學報(醫學版)
북경대학학보(의학판)
JOURNAL OF PEAKING UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2003年
1期
91-93
,共3页
王盛兰%钟延丰%管增伟%王薇%廖松林
王盛蘭%鐘延豐%管增偉%王薇%廖鬆林
왕성란%종연봉%관증위%왕미%료송림
凋亡%显微镜检查,电子%显微镜检查,荧光
凋亡%顯微鏡檢查,電子%顯微鏡檢查,熒光
조망%현미경검사,전자%현미경검사,형광
目的:探讨荧光显微技术在检测细胞凋亡中的作用.方法:应用拓扑异构酶Ⅱ抑制剂VP-16及化学毒物叠氮钠分别诱导HL-60细胞凋亡和死亡,用透射电镜和经Hoechst 33258染色的荧光显微镜对凋亡及死亡动态观察和定量分析.结果:HL-60细胞在VP16处理后,荧光显微镜下可见核浓缩、染色质凝聚、核碎裂等凋亡特征;而叠氮钠诱导的细胞死亡则出现核溶解、核染色质弥散,但无上述改变;两者电镜的观察与荧光显微镜的改变一致;凋亡细胞及坏死细胞荧光显微镜下呈不同的形态特征.对处理的不同时间点细胞的荧光显微镜观察发现:处理后4 h核形态开始变化,有核浓缩的细胞比例在处理的8 h达高峰,然后下降,核碎裂细胞的比例在24 h达高峰,约占80%,表明核浓缩发生在核碎裂之前.结论:荧光显微镜技术可明确观察判断细胞凋亡及坏死,并可进行动态及定量分析,是良好的凋亡检测方法.
目的:探討熒光顯微技術在檢測細胞凋亡中的作用.方法:應用拓撲異構酶Ⅱ抑製劑VP-16及化學毒物疊氮鈉分彆誘導HL-60細胞凋亡和死亡,用透射電鏡和經Hoechst 33258染色的熒光顯微鏡對凋亡及死亡動態觀察和定量分析.結果:HL-60細胞在VP16處理後,熒光顯微鏡下可見覈濃縮、染色質凝聚、覈碎裂等凋亡特徵;而疊氮鈉誘導的細胞死亡則齣現覈溶解、覈染色質瀰散,但無上述改變;兩者電鏡的觀察與熒光顯微鏡的改變一緻;凋亡細胞及壞死細胞熒光顯微鏡下呈不同的形態特徵.對處理的不同時間點細胞的熒光顯微鏡觀察髮現:處理後4 h覈形態開始變化,有覈濃縮的細胞比例在處理的8 h達高峰,然後下降,覈碎裂細胞的比例在24 h達高峰,約佔80%,錶明覈濃縮髮生在覈碎裂之前.結論:熒光顯微鏡技術可明確觀察判斷細胞凋亡及壞死,併可進行動態及定量分析,是良好的凋亡檢測方法.
목적:탐토형광현미기술재검측세포조망중적작용.방법:응용탁복이구매Ⅱ억제제VP-16급화학독물첩담납분별유도HL-60세포조망화사망,용투사전경화경Hoechst 33258염색적형광현미경대조망급사망동태관찰화정량분석.결과:HL-60세포재VP16처리후,형광현미경하가견핵농축、염색질응취、핵쇄렬등조망특정;이첩담납유도적세포사망칙출현핵용해、핵염색질미산,단무상술개변;량자전경적관찰여형광현미경적개변일치;조망세포급배사세포형광현미경하정불동적형태특정.대처리적불동시간점세포적형광현미경관찰발현:처리후4 h핵형태개시변화,유핵농축적세포비례재처리적8 h체고봉,연후하강,핵쇄렬세포적비례재24 h체고봉,약점80%,표명핵농축발생재핵쇄렬지전.결론:형광현미경기술가명학관찰판단세포조망급배사,병가진행동태급정량분석,시량호적조망검측방법.