福建农林大学学报(自然科学版)
福建農林大學學報(自然科學版)
복건농림대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURAL UNIVERSITY
2002年
4期
490-494
,共5页
银杏%第1染色体%微分离微克隆%单染色体DNA文库
銀杏%第1染色體%微分離微剋隆%單染色體DNA文庫
은행%제1염색체%미분리미극륭%단염색체DNA문고
观察了50个银杏根尖的染色体,发现在约半数根尖中,最大的1对染色体(第1染色体)随体有差异,其中1条随体较大而明显,另1条则很小.采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离了随体较为明显的那条第1染色体.将分离到的单条染色体去蛋白,Sau3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头,进行2轮PCR扩增,得到了大小为300-3 000 bp的扩增片段.用第2轮PCR产物构建质粒文库,得到了约含有75 000个重组子的该染色体DNA文库.随机挑取66个重组子进行分析,发现插入片段大小主要分布在500-2 000 bp,平均为800 bp.该文库为银杏第1染色体特异探针的筛选、遗传图谱的构建、重要基因的克隆以及性染色体的鉴别等研究提供了基础.
觀察瞭50箇銀杏根尖的染色體,髮現在約半數根尖中,最大的1對染色體(第1染色體)隨體有差異,其中1條隨體較大而明顯,另1條則很小.採用玻璃針分離法,通過顯微操作繫統成功地分離瞭隨體較為明顯的那條第1染色體.將分離到的單條染色體去蛋白,Sau3A酶切,併在染色體DNA片段兩耑加上Sau3A人工接頭,進行2輪PCR擴增,得到瞭大小為300-3 000 bp的擴增片段.用第2輪PCR產物構建質粒文庫,得到瞭約含有75 000箇重組子的該染色體DNA文庫.隨機挑取66箇重組子進行分析,髮現插入片段大小主要分佈在500-2 000 bp,平均為800 bp.該文庫為銀杏第1染色體特異探針的篩選、遺傳圖譜的構建、重要基因的剋隆以及性染色體的鑒彆等研究提供瞭基礎.
관찰료50개은행근첨적염색체,발현재약반수근첨중,최대적1대염색체(제1염색체)수체유차이,기중1조수체교대이명현,령1조칙흔소.채용파리침분리법,통과현미조작계통성공지분리료수체교위명현적나조제1염색체.장분리도적단조염색체거단백,Sau3A매절,병재염색체DNA편단량단가상Sau3A인공접두,진행2륜PCR확증,득도료대소위300-3 000 bp적확증편단.용제2륜PCR산물구건질립문고,득도료약함유75 000개중조자적해염색체DNA문고.수궤도취66개중조자진행분석,발현삽입편단대소주요분포재500-2 000 bp,평균위800 bp.해문고위은행제1염색체특이탐침적사선、유전도보적구건、중요기인적극륭이급성염색체적감별등연구제공료기출.
