中华男科学
中華男科學
중화남과학
NATIONAL JOURNAL OF ANDROLOGY
2002年
3期
173-177
,共5页
王书奎%黄宇烽%夏欣一%李保仝%王自正%刘猛六
王書奎%黃宇烽%夏訢一%李保仝%王自正%劉猛六
왕서규%황우봉%하흔일%리보동%왕자정%류맹륙
磷脂酶A2%纯化%单克隆抗体%鉴定%人精浆
燐脂酶A2%純化%單剋隆抗體%鑒定%人精漿
린지매A2%순화%단극륭항체%감정%인정장
目的:制备并鉴定人精浆磷脂酶A2(PLA2)的单克隆抗体(McAb). 方法:通过PEG沉淀、Sephacryl S-300柱层析、DEAE-Sephadex A-25柱层析及羟基磷灰石(HA)柱层析分离纯化人精浆中的PLA2,并以SDS-PAGE鉴定其分子量及蛋白浓度;免疫BALB/C小鼠制备抗PLA2 McAb,通过ELISA技术、Western-Blot方法鉴定其敏感性及特异性. 结果:从精浆中提纯的PLA2的相对分子质量(Mr)约为34 900,纯化倍数约为245倍.制备的McAb经鼠Ig亚类分析为IgM Kappa型,敏感性可达1∶ 56～1∶ 58,Western-Blot证明其特异结合的抗原即为PLA2蛋白酶.结论:Mr为34 900的PLA2可能为一种新型PLA2.该PLA2的McAb的制备将为研究人精浆中PLA2与男性生殖能力的关系提供广阔的前景.
目的:製備併鑒定人精漿燐脂酶A2(PLA2)的單剋隆抗體(McAb). 方法:通過PEG沉澱、Sephacryl S-300柱層析、DEAE-Sephadex A-25柱層析及羥基燐灰石(HA)柱層析分離純化人精漿中的PLA2,併以SDS-PAGE鑒定其分子量及蛋白濃度;免疫BALB/C小鼠製備抗PLA2 McAb,通過ELISA技術、Western-Blot方法鑒定其敏感性及特異性. 結果:從精漿中提純的PLA2的相對分子質量(Mr)約為34 900,純化倍數約為245倍.製備的McAb經鼠Ig亞類分析為IgM Kappa型,敏感性可達1∶ 56～1∶ 58,Western-Blot證明其特異結閤的抗原即為PLA2蛋白酶.結論:Mr為34 900的PLA2可能為一種新型PLA2.該PLA2的McAb的製備將為研究人精漿中PLA2與男性生殖能力的關繫提供廣闊的前景.
목적:제비병감정인정장린지매A2(PLA2)적단극륭항체(McAb). 방법:통과PEG침정、Sephacryl S-300주층석、DEAE-Sephadex A-25주층석급간기린회석(HA)주층석분리순화인정장중적PLA2,병이SDS-PAGE감정기분자량급단백농도;면역BALB/C소서제비항PLA2 McAb,통과ELISA기술、Western-Blot방법감정기민감성급특이성. 결과:종정장중제순적PLA2적상대분자질량(Mr)약위34 900,순화배수약위245배.제비적McAb경서Ig아류분석위IgM Kappa형,민감성가체1∶ 56～1∶ 58,Western-Blot증명기특이결합적항원즉위PLA2단백매.결론:Mr위34 900적PLA2가능위일충신형PLA2.해PLA2적McAb적제비장위연구인정장중PLA2여남성생식능력적관계제공엄활적전경.
