农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2002年
1期
67-71
,共5页
李园莉%江元清%赵武玲%阎隆飞
李園莉%江元清%趙武玲%閻隆飛
리완리%강원청%조무령%염륭비
向日葵%肌动蛋白基因%快速扩增cDNA末端%系统树
嚮日葵%肌動蛋白基因%快速擴增cDNA末耑%繫統樹
향일규%기동단백기인%쾌속확증cDNA말단%계통수
本研究以向日葵(Helianthus annuus)为材料,提取其总RNA,根据植物肌动蛋白基因编码区的5'和3'朱端设计简并引物.利用RT-PCR技术,用5'RACE试剂盒扩增出向日葵肌动蛋白基因编码区全长.以豌豆肌动蛋白cDNA作探针的Southem杂交检测表明扩增出了肌动蛋白基因.将所获片段克隆到pGEM-T载体后进行测序,所得序列与GenBank已知肌动蛋白基因序列的相似性均在60%以上,其中与之相似性最高的锦葵为85%;与主要高等植物肌动蛋白氨基酸序列的相似性达80%以上.根据氨基酸序列的相似性绘制主要高等植物肌动蛋白的系统树(种系树),表明向日葵肌动蛋白与锦葵肌动蛋白可能由同一祖先进化而来.
本研究以嚮日葵(Helianthus annuus)為材料,提取其總RNA,根據植物肌動蛋白基因編碼區的5'和3'硃耑設計簡併引物.利用RT-PCR技術,用5'RACE試劑盒擴增齣嚮日葵肌動蛋白基因編碼區全長.以豌豆肌動蛋白cDNA作探針的Southem雜交檢測錶明擴增齣瞭肌動蛋白基因.將所穫片段剋隆到pGEM-T載體後進行測序,所得序列與GenBank已知肌動蛋白基因序列的相似性均在60%以上,其中與之相似性最高的錦葵為85%;與主要高等植物肌動蛋白氨基痠序列的相似性達80%以上.根據氨基痠序列的相似性繪製主要高等植物肌動蛋白的繫統樹(種繫樹),錶明嚮日葵肌動蛋白與錦葵肌動蛋白可能由同一祖先進化而來.
본연구이향일규(Helianthus annuus)위재료,제취기총RNA,근거식물기동단백기인편마구적5'화3'주단설계간병인물.이용RT-PCR기술,용5'RACE시제합확증출향일규기동단백기인편마구전장.이완두기동단백cDNA작탐침적Southem잡교검측표명확증출료기동단백기인.장소획편단극륭도pGEM-T재체후진행측서,소득서렬여GenBank이지기동단백기인서렬적상사성균재60%이상,기중여지상사성최고적금규위85%;여주요고등식물기동단백안기산서렬적상사성체80%이상.근거안기산서렬적상사성회제주요고등식물기동단백적계통수(충계수),표명향일규기동단백여금규기동단백가능유동일조선진화이래.