CAJ | 학술논문

目的:探讨AD-VEGF-siRNA对荷人骨肉瘤裸鼠瘤体组织以及血液中VEGF表达的影响.方法:应用VEGF高表达人骨肉瘤细胞系MG-63制备荷骨肉瘤裸鼠模型;成瘤组动物随机分为3组,AD-VEGF-siRNA组15只:AD-EGFP组15只;PBS组15只.另留取3只裸小鼠,未接种肿瘤细胞,未注射药物.成瘤裸鼠瘤体内分别注射上述各组药物,隔天1次,200μl/次,共5次,病毒总量2×109PFU.接种后第11天、14天、17天实验各组分别处死3只裸小鼠.用ELISA法栓测各组荷瘤小鼠血液和瘤体组织中VEGF蛋白表达情况.试验结束(第19天)处死剩余裸小鼠.用RT-PCR及免疫组化技术检测裸小鼠瘤体组织VEGF的表达,用EUSA法检测各组荷瘤小鼠血液和瘤体组织中VEGF蛋白的表达.结果:1)各组裸小鼠约在接种5天成瘤;2)用AD-VEGF-siRNA处理后,RT-PCR检测发现裸小鼠瘤体组织的VEGF mRNA表达水平明显低于两对照组(P＜0.05);3)免疫组化检测发现AD-VEGF-siRNA组VEGF蛋白表达明显减少;4)ELISA检测发现成瘤组小鼠血清VEGF蛋白水平明显高于未作任何处理的健康裸小鼠组(P＜0.05),在各时间段AD-VEGF-siRNA组血液及瘤体组织中VEGF蛋白的表达水平明显低于两对照组(P＜0.05).结论:AD-VEGF-siRNA在体内可以抑制荷骨肉瘤裸小鼠瘤体VEGF基因的表达及血液中VEGF的水平;应用siRNA腺病毒表达载体技术为骨肉瘤抗血管生成的治疗提供了借鉴.
목적:탐토AD-VEGF-siRNA대하인골육류라서류체조직이급혈액중VEGF표체적영향.방법:응용VEGF고표체인골육류세포계MG-63제비하골육류라서모형;성류조동물수궤분위3조,AD-VEGF-siRNA조15지:AD-EGFP조15지;PBS조15지.령류취3지라소서,미접충종류세포,미주사약물.성류라서류체내분별주사상술각조약물,격천1차,200μl/차,공5차,병독총량2×109PFU.접충후제11천、14천、17천실험각조분별처사3지라소서.용ELISA법전측각조하류소서혈액화류체조직중VEGF단백표체정황.시험결속(제19천)처사잉여라소서.용RT-PCR급면역조화기술검측라소서류체조직VEGF적표체,용EUSA법검측각조하류소서혈액화류체조직중VEGF단백적표체.결과:1)각조라소서약재접충5천성류;2)용AD-VEGF-siRNA처리후,RT-PCR검측발현라소서류체조직적VEGF mRNA표체수평명현저우량대조조(P＜0.05);3)면역조화검측발현AD-VEGF-siRNA조VEGF단백표체명현감소;4)ELISA검측발현성류조소서혈청VEGF단백수평명현고우미작임하처리적건강라소서조(P＜0.05),재각시간단AD-VEGF-siRNA조혈액급류체조직중VEGF단백적표체수평명현저우량대조조(P＜0.05).결론:AD-VEGF-siRNA재체내가이억제하골육류라소서류체VEGF기인적표체급혈액중VEGF적수평;응용siRNA선병독표체재체기술위골육류항혈관생성적치료제공료차감.