中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2008年
8期
601-604
,共4页
刘伟%易新元%曾宪芳%蔡春%曾庆仁%蔡力汀%曾铁兵%范久波
劉偉%易新元%曾憲芳%蔡春%曾慶仁%蔡力汀%曾鐵兵%範久波
류위%역신원%증헌방%채춘%증경인%채력정%증철병%범구파
血吸虫,日本%铁蛋白%粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子%DNA疫苗%保护性免疫
血吸蟲,日本%鐵蛋白%粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子%DNA疫苗%保護性免疫
혈흡충,일본%철단백%립세포-거서세포집락자격인자%DNA역묘%보호성면역
目的 构建日本血吸虫铁蛋白proVAX/GMCSF-SjFer DNA疫苗,观察其诱导小鼠产生抗攻击感染的免疫保护性效果. 方法 小量制备pGMC/SjFer重组质粒DNA,PCR扩增GMCSF-SjFer基因,将此目的 片段亚克隆到真核表达载体proVAX中,构建重组真核表达质粒proVAX/ GMCSF-SjFer.雌性昆明鼠随机分为对照组、免疫组和空质粒组.空质粒组小鼠股四头肌注射proVAX,免疫组同法注射重组质粒proVAX/GMCSF-SjFer,对照组注射生理盐水.按0、2、6周设计接种3次.末次接种后第2周,感染血吸虫尾蚴(40±2)条/鼠.感染后第42 d剖杀小鼠,灌注法冲虫,计数虫荷和克肝卵数.免疫前和免疫后2周留取小鼠血清,用ELISA法检测抗血吸虫成虫抗体水平. 结果 经PCR和双酶切鉴定,获得1条约为960 bp的目的 片段和2条酶切片段.免疫组小鼠的减虫率及减卵率分别为22.46%和29.40%,空质粒对照组分别为3.11%和7.79%,差异有统计学意义(P<0.05).ELISA检测免疫组小鼠血清特异性IgG抗体水平增高. 结论 构建的DNA疫苗proVAX/GMCSF-SjFer能诱导小鼠产生一定水平的保护性免疫.
目的 構建日本血吸蟲鐵蛋白proVAX/GMCSF-SjFer DNA疫苗,觀察其誘導小鼠產生抗攻擊感染的免疫保護性效果. 方法 小量製備pGMC/SjFer重組質粒DNA,PCR擴增GMCSF-SjFer基因,將此目的 片段亞剋隆到真覈錶達載體proVAX中,構建重組真覈錶達質粒proVAX/ GMCSF-SjFer.雌性昆明鼠隨機分為對照組、免疫組和空質粒組.空質粒組小鼠股四頭肌註射proVAX,免疫組同法註射重組質粒proVAX/GMCSF-SjFer,對照組註射生理鹽水.按0、2、6週設計接種3次.末次接種後第2週,感染血吸蟲尾蚴(40±2)條/鼠.感染後第42 d剖殺小鼠,灌註法遲蟲,計數蟲荷和剋肝卵數.免疫前和免疫後2週留取小鼠血清,用ELISA法檢測抗血吸蟲成蟲抗體水平. 結果 經PCR和雙酶切鑒定,穫得1條約為960 bp的目的 片段和2條酶切片段.免疫組小鼠的減蟲率及減卵率分彆為22.46%和29.40%,空質粒對照組分彆為3.11%和7.79%,差異有統計學意義(P<0.05).ELISA檢測免疫組小鼠血清特異性IgG抗體水平增高. 結論 構建的DNA疫苗proVAX/GMCSF-SjFer能誘導小鼠產生一定水平的保護性免疫.
목적 구건일본혈흡충철단백proVAX/GMCSF-SjFer DNA역묘,관찰기유도소서산생항공격감염적면역보호성효과. 방법 소량제비pGMC/SjFer중조질립DNA,PCR확증GMCSF-SjFer기인,장차목적 편단아극륭도진핵표체재체proVAX중,구건중조진핵표체질립proVAX/ GMCSF-SjFer.자성곤명서수궤분위대조조、면역조화공질립조.공질립조소서고사두기주사proVAX,면역조동법주사중조질립proVAX/GMCSF-SjFer,대조조주사생리염수.안0、2、6주설계접충3차.말차접충후제2주,감염혈흡충미유(40±2)조/서.감염후제42 d부살소서,관주법충충,계수충하화극간란수.면역전화면역후2주류취소서혈청,용ELISA법검측항혈흡충성충항체수평. 결과 경PCR화쌍매절감정,획득1조약위960 bp적목적 편단화2조매절편단.면역조소서적감충솔급감란솔분별위22.46%화29.40%,공질립대조조분별위3.11%화7.79%,차이유통계학의의(P<0.05).ELISA검측면역조소서혈청특이성IgG항체수평증고. 결론 구건적DNA역묘proVAX/GMCSF-SjFer능유도소서산생일정수평적보호성면역.
