中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
37期
6841-6846
,共6页
侯克东%袁玫%张莉%郭全义%彭江%眭翔%赵斌%刘舒云%卢世璧
侯剋東%袁玫%張莉%郭全義%彭江%眭翔%趙斌%劉舒雲%盧世璧
후극동%원매%장리%곽전의%팽강%휴상%조빈%류서운%로세벽
脐带%间充质干细胞%软骨%支架%组织工程软骨
臍帶%間充質榦細胞%軟骨%支架%組織工程軟骨
제대%간충질간세포%연골%지가%조직공정연골
背景:构建组织工程软骨的方法多为自体种子细胞复合天然或合成物支架,目前多存在种子细胞来源有限、支架安全性和生物相容性、以及细胞在支架中分布不均的问题.目的:探讨人脐带Wharton胶中间充质干细胞向软骨诱导分化并体外构建无支架组织工程软骨的可行性.方法:分离培养人脐带Wharton胶中的间充质干细胞,进行流式细胞学鉴定.对软骨诱导前后的细胞进行组织学和免疫组织化学染色,对其表达的葡萄糖胺聚糖和Ⅱ型胶原进行定量研究,并应用RT-PCR检测软骨诱导前后Ⅱ型胶原和Sox-9mRNA的表达.采用密集诱导培养→离心管培养→生物反应器培养,进行体外构建无支架软骨组织.结果与结论:人脐带Wharton胶富含干细胞,流式细胞仪检测结果显示这些细胞不表达造血干细胞标志,表达CD44,CD105、CD271等间充质干细胞表面标志;HLA-ABC阳性表达,HLA-DPDQDR阴性表达.未进行软骨诱导的细胞弱表达软骨细胞标志,诱导后葡萄糖胺聚糖和Ⅱ型胶原显著增高.RT-PCR结果显示人脐带Wharton胶间充质干细胞诱导前后均表达Sox-9、Ⅱ型胶原mRNA.说明人脐带Wharton胶间充质干细胞具有前软骨细胞的特性.采用密集诱导培养结合生物反应器培养,不用支架,体外可以构建成大块组织工一[程软骨.表明人脐带Wharton胶间充质干细胞是一种良好的构建组织工程软骨的种子细胞.
揹景:構建組織工程軟骨的方法多為自體種子細胞複閤天然或閤成物支架,目前多存在種子細胞來源有限、支架安全性和生物相容性、以及細胞在支架中分佈不均的問題.目的:探討人臍帶Wharton膠中間充質榦細胞嚮軟骨誘導分化併體外構建無支架組織工程軟骨的可行性.方法:分離培養人臍帶Wharton膠中的間充質榦細胞,進行流式細胞學鑒定.對軟骨誘導前後的細胞進行組織學和免疫組織化學染色,對其錶達的葡萄糖胺聚糖和Ⅱ型膠原進行定量研究,併應用RT-PCR檢測軟骨誘導前後Ⅱ型膠原和Sox-9mRNA的錶達.採用密集誘導培養→離心管培養→生物反應器培養,進行體外構建無支架軟骨組織.結果與結論:人臍帶Wharton膠富含榦細胞,流式細胞儀檢測結果顯示這些細胞不錶達造血榦細胞標誌,錶達CD44,CD105、CD271等間充質榦細胞錶麵標誌;HLA-ABC暘性錶達,HLA-DPDQDR陰性錶達.未進行軟骨誘導的細胞弱錶達軟骨細胞標誌,誘導後葡萄糖胺聚糖和Ⅱ型膠原顯著增高.RT-PCR結果顯示人臍帶Wharton膠間充質榦細胞誘導前後均錶達Sox-9、Ⅱ型膠原mRNA.說明人臍帶Wharton膠間充質榦細胞具有前軟骨細胞的特性.採用密集誘導培養結閤生物反應器培養,不用支架,體外可以構建成大塊組織工一[程軟骨.錶明人臍帶Wharton膠間充質榦細胞是一種良好的構建組織工程軟骨的種子細胞.
배경:구건조직공정연골적방법다위자체충자세포복합천연혹합성물지가,목전다존재충자세포래원유한、지가안전성화생물상용성、이급세포재지가중분포불균적문제.목적:탐토인제대Wharton효중간충질간세포향연골유도분화병체외구건무지가조직공정연골적가행성.방법:분리배양인제대Wharton효중적간충질간세포,진행류식세포학감정.대연골유도전후적세포진행조직학화면역조직화학염색,대기표체적포도당알취당화Ⅱ형효원진행정량연구,병응용RT-PCR검측연골유도전후Ⅱ형효원화Sox-9mRNA적표체.채용밀집유도배양→리심관배양→생물반응기배양,진행체외구건무지가연골조직.결과여결론:인제대Wharton효부함간세포,류식세포의검측결과현시저사세포불표체조혈간세포표지,표체CD44,CD105、CD271등간충질간세포표면표지;HLA-ABC양성표체,HLA-DPDQDR음성표체.미진행연골유도적세포약표체연골세포표지,유도후포도당알취당화Ⅱ형효원현저증고.RT-PCR결과현시인제대Wharton효간충질간세포유도전후균표체Sox-9、Ⅱ형효원mRNA.설명인제대Wharton효간충질간세포구유전연골세포적특성.채용밀집유도배양결합생물반응기배양,불용지가,체외가이구건성대괴조직공일[정연골.표명인제대Wharton효간충질간세포시일충량호적구건조직공정연골적충자세포.
