CAJ | 학술논문

肝癌抑制基因-1(hepatocellular carcinorna suppressor 1,HCCS1)是一种潜在的肝癌抑制基因,在细胞内发挥蛋白分拣运输的作用,其抑癌作用有可能与蛋白转运的功能有一定的关系.本研究旨在寻找HCCS1序列中与转运功能相关的序列区域.首先通过亚克隆技术,构建以pEGFP-C2为载体,对不同长度HCCS1-cDNA片段进行亚克隆,将构建的亚克隆转染到HeLa细胞,通过免疫荧光显微镜观察不同长度HCCS1蛋白在细胞内的分布,及其与6-磷酸甘露糖受体(M6PR)的共定位.经过PCR及亚克隆后,目的片段成功插入载体质粒,构建了以pEGFPC2为载体的含有4个不同长度HCCS1片段的亚克隆.分别是:pEGFP-C2-N1836,pEGFP-C2-N1572,pEGFP-C2-1707和pEGFP-C2-1506,其中pEGFP-C2-N1836和pEGFP-C2-N1572编码的HCCS1蛋白,长度不同均呈颗粒状、极性分布于核周的胞质内,且与M6PR有共定位;而pEGFP-C2-1707片段编码的HCCS1蛋白虽然也呈颗粒状分布于核周,但极性分布消失,且与M6PR共定位消失;pEGFP-C2-1506与pEGFP-C2-1707结果相似.结果显示了HCCS1-cDNA的5'端的129 bp序列为与HCCS1的极性及M6PR共定位相关的区域.
간암억제기인-1(hepatocellular carcinorna suppressor 1,HCCS1)시일충잠재적간암억제기인,재세포내발휘단백분간운수적작용,기억암작용유가능여단백전운적공능유일정적관계.본연구지재심조HCCS1서렬중여전운공능상관적서렬구역.수선통과아극륭기술,구건이pEGFP-C2위재체,대불동장도HCCS1-cDNA편단진행아극륭,장구건적아극륭전염도HeLa세포,통과면역형광현미경관찰불동장도HCCS1단백재세포내적분포,급기여6-린산감로당수체(M6PR)적공정위.경과PCR급아극륭후,목적편단성공삽입재체질립,구건료이pEGFPC2위재체적함유4개불동장도HCCS1편단적아극륭.분별시:pEGFP-C2-N1836,pEGFP-C2-N1572,pEGFP-C2-1707화pEGFP-C2-1506,기중pEGFP-C2-N1836화pEGFP-C2-N1572편마적HCCS1단백,장도불동균정과립상、겁성분포우핵주적포질내,차여M6PR유공정위;이pEGFP-C2-1707편단편마적HCCS1단백수연야정과립상분포우핵주,단겁성분포소실,차여M6PR공정위소실;pEGFP-C2-1506여pEGFP-C2-1707결과상사.결과현시료HCCS1-cDNA적5'단적129 bp서렬위여HCCS1적겁성급M6PR공정위상관적구역.