CAJ | 학술논문

目的观察不同浓度胰岛素对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)形态和细胞活性的影响,用以筛选内皮细胞胰岛素抵抗模型.方法应用含不同浓度胰岛素(50,40,30,20,10,1,0.1,0.01U/L)的DMEM培养基与HUVEC共同培养6、12、24、36、48、72 h;观察细胞形态学变化;四甲基偶氮唑盐比色法(tet-razolium colormetric assay,MTT)测定细胞活性.结果 ①细胞形态学变化:当胰岛素浓度小于10 U/L,HUVEC生长加速;当胰岛素浓度为30U/L时,HUVEC出现核同缩;当胰岛素浓度达到50U/L时,HUVEC出现核碎裂和核溶解.②MTT法测定细胞活性:与0.01 U/L组比较,当胰岛素浓度为50U/L时,细胞活性显著下降(P<0.01),当胰岛素浓度小于10 U/L时,模型组细胞活性无统计学变化(P>0.05).当作用时间超过36 h,残留细胞数明显下降,细胞活性显著降低(P<0.01).③析因设计资料的方差分析结果:不同胰岛素剂量组问差异有统计学意义(P<0.01);不同用药时间(胰岛素作用时间)组间差异有统计学意义(P<0.01);胰岛素剂量和用药时间之间交互效应有统计学意义(P<0.01);模型拟合效果理想,R<'2>=0.928.交互效应轮廓图也提示胰岛素给药剂量和作用时间存在交互效应.结论胰岛素对人脐静脉内皮细胞的生长发育具有双向调控作用,胰岛素浓度30U/L、作用时间48h的有可能成为血管内皮细胞胰岛素抵抗的细胞模型.
목적 관찰불동농도이도소대인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)형태화세포활성적영향,용이사선내피세포이도소저항모형.방법 응용함불동농도이도소(50,40,30,20,10,1,0.1,0.01U/L)적DMEM배양기여HUVEC공동배양6、12、24、36、48、72 h;관찰세포형태학변화;사갑기우담서염비색법(tet-razolium colormetric assay,MTT)측정세포활성.결과 ①세포형태학변화:당이도소농도소우10 U/L,HUVEC생장가속;당이도소농도위30U/L시,HUVEC출현핵동축;당이도소농도체도50U/L시,HUVEC출현핵쇄렬화핵용해.②MTT법측정세포활성:여0.01 U/L조비교,당이도소농도위50U/L시,세포활성현저하강(P<0.01),당이도소농도소우10 U/L시,모형조세포활성무통계학변화(P>0.05).당작용시간초과36 h,잔류세포수명현하강,세포활성현저강저(P<0.01).③석인설계자료적방차분석결과:불동이도소제량조문차이유통계학의의(P<0.01);불동용약시간(이도소작용시간)조간차이유통계학의의(P<0.01);이도소제량화용약시간지간교호효응유통계학의의(P<0.01);모형의합효과이상,R<'2>=0.928.교호효응륜곽도야제시이도소급약제량화작용시간존재교호효응.결론 이도소대인제정맥내피세포적생장발육구유쌍향조공작용,이도소농도30U/L、작용시간48h적유가능성위혈관내피세포이도소저항적세포모형.