CAJ | 학술논문

本试验旨在研究在体外培养条件下沙棘总黄酮(total flavones of Hippophae rhamnoides,TFH)及槲皮素(quercetin)对爱拔益加(AA)肉鸡鸡胚成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响及其作用机制.成骨细胞分别采用基础培养液、基础培养液添加β -雌二醇(β-estradiol,E2)、TFH或槲皮素培养细胞24 h；细胞经雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂处理2h,再分别于基础培养液、基础培养液添加TFH或槲皮素中培养24 h；细胞经胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)抑制剂处理2h,再分别于基础培养液、基础培养液添加TFH或槲皮素培养24 h；收集细胞,测定细胞ALP活性.基础培养液添加TFH、槲皮素,于孵育0、2、5、15、30、60 min 6个时间点收集细胞,ELASA法测定磷酸化胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular-regulated kinase,p-ERK)浓度.细胞采用基础培养液培养细胞24 h后经基础培养液、基础培养液分别添加E2、TFH、槲皮素培养细胞30min；经ER拮抗剂处理15 min,再分别于基础培养液、基础培养液添加E2、TFH或槲皮素培养30 min；收集细胞,ELASA法测定p-ERK浓度.结果表明:1)培养液添加TFH、槲皮素可以显著提高ALP活性(P＜0.05),ER拮抗剂、MEK抑制剂可完全阻断这2种黄酮的作用(P＜0.05)；2)培养液添加TFH在培养后5、15 min,槲皮素在培养后2、5、15、30、60 min ERK磷酸化水平显著提高(P＜0.05)；3)培养液添加TFH、槲皮素可显著提高细胞ERK磷酸化水平(P＜0.05),ER拮抗剂可完全阻断这一作用(P＜0.05).结果提示:TFH、槲皮素可以显著提高ALP活性和ERK磷酸化水平,具有雌激素样作用,二者可能是通过ER途径和ERK途径调节ALP活性.
본시험지재연구재체외배양조건하사극총황동(total flavones of Hippophae rhamnoides,TFH)급곡피소(quercetin)대애발익가(AA)육계계배성골세포감성린산매(alkaline phosphatase,ALP)활성적영향급기작용궤제.성골세포분별채용기출배양액、기출배양액첨가β -자이순(β-estradiol,E2)、TFH혹곡피소배양세포24 h；세포경자격소수체(estrogen receptor,ER)길항제처리2h,재분별우기출배양액、기출배양액첨가TFH혹곡피소중배양24 h；세포경포외신호조절격매(extracellular signal-regulated kinase,ERK)억제제처리2h,재분별우기출배양액、기출배양액첨가TFH혹곡피소배양24 h；수집세포,측정세포ALP활성.기출배양액첨가TFH、곡피소,우부육0、2、5、15、30、60 min 6개시간점수집세포,ELASA법측정린산화포외신호조절격매(phosphorylated extracellular-regulated kinase,p-ERK)농도.세포채용기출배양액배양세포24 h후경기출배양액、기출배양액분별첨가E2、TFH、곡피소배양세포30min；경ER길항제처리15 min,재분별우기출배양액、기출배양액첨가E2、TFH혹곡피소배양30 min；수집세포,ELASA법측정p-ERK농도.결과표명:1)배양액첨가TFH、곡피소가이현저제고ALP활성(P＜0.05),ER길항제、MEK억제제가완전조단저2충황동적작용(P＜0.05)；2)배양액첨가TFH재배양후5、15 min,곡피소재배양후2、5、15、30、60 min ERK린산화수평현저제고(P＜0.05)；3)배양액첨가TFH、곡피소가현저제고세포ERK린산화수평(P＜0.05),ER길항제가완전조단저일작용(P＜0.05).결과제시:TFH、곡피소가이현저제고ALP활성화ERK린산화수평,구유자격소양작용,이자가능시통과ER도경화ERK도경조절ALP활성.