生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2005年
2期
1-3
,共3页
翟静%曹奇志%张媛英%张凤珍
翟靜%曹奇誌%張媛英%張鳳珍
적정%조기지%장원영%장봉진
噬菌体 Ψ297%埃希氏大肠杆菌(EHEC)Ol57%Shiga毒素(Stx)%切除酶基因(xis)%特殊位点重组
噬菌體 Ψ297%埃希氏大腸桿菌(EHEC)Ol57%Shiga毒素(Stx)%切除酶基因(xis)%特殊位點重組
서균체 Ψ297%애희씨대장간균(EHEC)Ol57%Shiga독소(Stx)%절제매기인(xis)%특수위점중조
目的:克隆噬菌体Ψ297切除酶(xis)基因,并对其进行遗传与变异研究.方法:提取埃希氏大肠杆菌O157:H7菌株EH297染色体DNA,采用步移PCR方法寻找目的基因,并通过克隆、亚克隆、DNA测序等分子生物学方法获得切除酶基因,通过序列分析软件对此基因进行分析.结果:克隆获得噬茵体Ψ297编码的切除酶基因(xis)的完整序列,它的长度是255bp,编码了一个84个氨基酸组成的蛋白质(Xis),将它们的序列与λ噬菌体的切除酶家族的其它成员进行了比较.其结果是噬菌体Ψ297的切除酶基因(xis)与噬茵体VT1-Sakai的切除酶基因(xis)只有4个核苷酸的不同,而Xis蛋白与噬菌体VT1-Sakai的Xis蛋白是一样的,与噬菌体933W的Xis蛋白只有47.2%的相似性.结论:噬菌体Ψ297编码的切除酶基因(xis)与λ噬菌体的切除酶基因同源.
目的:剋隆噬菌體Ψ297切除酶(xis)基因,併對其進行遺傳與變異研究.方法:提取埃希氏大腸桿菌O157:H7菌株EH297染色體DNA,採用步移PCR方法尋找目的基因,併通過剋隆、亞剋隆、DNA測序等分子生物學方法穫得切除酶基因,通過序列分析軟件對此基因進行分析.結果:剋隆穫得噬茵體Ψ297編碼的切除酶基因(xis)的完整序列,它的長度是255bp,編碼瞭一箇84箇氨基痠組成的蛋白質(Xis),將它們的序列與λ噬菌體的切除酶傢族的其它成員進行瞭比較.其結果是噬菌體Ψ297的切除酶基因(xis)與噬茵體VT1-Sakai的切除酶基因(xis)隻有4箇覈苷痠的不同,而Xis蛋白與噬菌體VT1-Sakai的Xis蛋白是一樣的,與噬菌體933W的Xis蛋白隻有47.2%的相似性.結論:噬菌體Ψ297編碼的切除酶基因(xis)與λ噬菌體的切除酶基因同源.
목적:극륭서균체Ψ297절제매(xis)기인,병대기진행유전여변이연구.방법:제취애희씨대장간균O157:H7균주EH297염색체DNA,채용보이PCR방법심조목적기인,병통과극륭、아극륭、DNA측서등분자생물학방법획득절제매기인,통과서렬분석연건대차기인진행분석.결과:극륭획득서인체Ψ297편마적절제매기인(xis)적완정서렬,타적장도시255bp,편마료일개84개안기산조성적단백질(Xis),장타문적서렬여λ서균체적절제매가족적기타성원진행료비교.기결과시서균체Ψ297적절제매기인(xis)여서인체VT1-Sakai적절제매기인(xis)지유4개핵감산적불동,이Xis단백여서균체VT1-Sakai적Xis단백시일양적,여서균체933W적Xis단백지유47.2%적상사성.결론:서균체Ψ297편마적절제매기인(xis)여λ서균체적절제매기인동원.
