新乡医学院学报
新鄉醫學院學報
신향의학원학보
JOURNAL OF XINXIANG MEDICAL COLLEGE
2005年
2期
102-103,106
,共3页
李宪奎%张百芳%彭芳芳%杞少华%沈晗%吴少波%武栋成
李憲奎%張百芳%彭芳芳%杞少華%瀋晗%吳少波%武棟成
리헌규%장백방%팽방방%기소화%침함%오소파%무동성
TDAG51%凋亡%PC12%Caspase-3
TDAG51%凋亡%PC12%Caspase-3
TDAG51%조망%PC12%Caspase-3
目的探讨TDAG51基因在PC12细胞中的表达及其作用机制.方法实验分为3组,实验组用绿色荧光蛋白质粒(pEGFP -C1)载体把外源性TDAG51基因转染的PC12细胞;空载体对照组用pEGFP-C1转染的PC12细胞;对照组未转染任何试剂的PC12细胞.在转染后24 h、48 h、72 h收集细胞,用Western blotting检测过表达的TDAG51蛋白;转染后84 h用相差显微镜观察PC12细胞形态的变化;Hoechst33258染色观察细胞核形态变化;检测凋亡执行蛋白Caspase-3的变化.结果 TDAG51基因在PC12细胞中高表达;TDAG51基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,胞体变圆,轴突缺失;荧光显微镜下观察PC12细胞可见胞核固缩、染色质凝集,并可见核碎片;前Caspase-3蛋白活化被切割;活化的17kDaCaspase-3随TDAG51蛋白的作用时间延长而增多.结论过表达TDAG51基因可诱导PC12细胞凋亡.
目的探討TDAG51基因在PC12細胞中的錶達及其作用機製.方法實驗分為3組,實驗組用綠色熒光蛋白質粒(pEGFP -C1)載體把外源性TDAG51基因轉染的PC12細胞;空載體對照組用pEGFP-C1轉染的PC12細胞;對照組未轉染任何試劑的PC12細胞.在轉染後24 h、48 h、72 h收集細胞,用Western blotting檢測過錶達的TDAG51蛋白;轉染後84 h用相差顯微鏡觀察PC12細胞形態的變化;Hoechst33258染色觀察細胞覈形態變化;檢測凋亡執行蛋白Caspase-3的變化.結果 TDAG51基因在PC12細胞中高錶達;TDAG51基因過錶達的細胞與兩對照組細胞相比較,胞體變圓,軸突缺失;熒光顯微鏡下觀察PC12細胞可見胞覈固縮、染色質凝集,併可見覈碎片;前Caspase-3蛋白活化被切割;活化的17kDaCaspase-3隨TDAG51蛋白的作用時間延長而增多.結論過錶達TDAG51基因可誘導PC12細胞凋亡.
목적탐토TDAG51기인재PC12세포중적표체급기작용궤제.방법실험분위3조,실험조용록색형광단백질립(pEGFP -C1)재체파외원성TDAG51기인전염적PC12세포;공재체대조조용pEGFP-C1전염적PC12세포;대조조미전염임하시제적PC12세포.재전염후24 h、48 h、72 h수집세포,용Western blotting검측과표체적TDAG51단백;전염후84 h용상차현미경관찰PC12세포형태적변화;Hoechst33258염색관찰세포핵형태변화;검측조망집행단백Caspase-3적변화.결과 TDAG51기인재PC12세포중고표체;TDAG51기인과표체적세포여량대조조세포상비교,포체변원,축돌결실;형광현미경하관찰PC12세포가견포핵고축、염색질응집,병가견핵쇄편;전Caspase-3단백활화피절할;활화적17kDaCaspase-3수TDAG51단백적작용시간연장이증다.결론과표체TDAG51기인가유도PC12세포조망.
