中华医学超声杂志（电子版）
中華醫學超聲雜誌（電子版）
중화의학초성잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF MEDICAL ULTRASOUND(ELECTRONICAL VISION)
2006年
1期
5-10
,共6页
叶欣%邹玉红%刘丽霞%魏绪庭%侯刚%葛忠民%李毅%刘爱华%杨宪勇
葉訢%鄒玉紅%劉麗霞%魏緒庭%侯剛%葛忠民%李毅%劉愛華%楊憲勇
협흔%추옥홍%류려하%위서정%후강%갈충민%리의%류애화%양헌용
高强度聚焦超声%肿瘤抗原%白细胞介素12%干扰素Ⅱ型
高彊度聚焦超聲%腫瘤抗原%白細胞介素12%榦擾素Ⅱ型
고강도취초초성%종류항원%백세포개소12%간우소Ⅱ형
目的探讨采用高强度聚焦超声(HIFU)辐照肿瘤细胞制备肿瘤抗原致敏树突状细胞(DC)和制备DC肿瘤疫苗的可行性.方法 (1)采用1 ng/ml IL-4和10 ng/ml GM-CSF联合诱导小鼠骨髓细胞产生DC,并用流式细胞仪检测DC的CD80、CD86、H-2Kd和I-Ad表达情况;(2)固定辐照时间或超声声强,应用不同声强或辐照时间的HIFU辐照CT26细胞株后,用台盼蓝染色、MTT法检测活肿瘤细胞数,同时用台盼蓝染色观察肿瘤细胞的形态学变化,分析HIFU剂量与肿瘤细胞存活率的关系,了解剂量-效应关系;(3)固定辐照时间和超声强度,HIFU辐照CT26细胞悬液,制备肿瘤细胞抗原并致敏DC,致敏DC与T细胞共孵育48 h后提取上清液,通过ELISA法检测上清中IL-12、γ干扰素(IFN-γ)的含量,并与冻融组、单纯CT26、对照组进行比较.结果 (1)采用IL-4和GM-CSF联合诱导小鼠骨髓细胞可培养出典型的DC;(2)固定辐照时间,随着HIFU辐照剂量的增加肿瘤细胞的存活率迅速减少,肿瘤细胞的碎片逐渐增多,当声强为1000 W/cm2,辐照30 s时,无细胞存活,肿瘤细胞失去正常形态,全部被撕裂成碎片;(3)通过ELISA法检测HIFU、冻融及单纯CT26组上清液中IL-12、IFN-γ的含量显著高于对照组(P均＜0.05),HIFU及冻融组上清液中IL-12、IFN-γ的含量高于单纯CT26组(P均＜0.05),但HIFU、冻融组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HIFU能灭活肿瘤细胞并能使肿瘤细胞破碎,HIFU制备的肿瘤抗原可体外致敏DC,并可使DC成熟分泌大量IL-12,同时诱导T细胞分泌大量IFN-γ.
目的探討採用高彊度聚焦超聲(HIFU)輻照腫瘤細胞製備腫瘤抗原緻敏樹突狀細胞(DC)和製備DC腫瘤疫苗的可行性.方法 (1)採用1 ng/ml IL-4和10 ng/ml GM-CSF聯閤誘導小鼠骨髓細胞產生DC,併用流式細胞儀檢測DC的CD80、CD86、H-2Kd和I-Ad錶達情況;(2)固定輻照時間或超聲聲彊,應用不同聲彊或輻照時間的HIFU輻照CT26細胞株後,用檯盼藍染色、MTT法檢測活腫瘤細胞數,同時用檯盼藍染色觀察腫瘤細胞的形態學變化,分析HIFU劑量與腫瘤細胞存活率的關繫,瞭解劑量-效應關繫;(3)固定輻照時間和超聲彊度,HIFU輻照CT26細胞懸液,製備腫瘤細胞抗原併緻敏DC,緻敏DC與T細胞共孵育48 h後提取上清液,通過ELISA法檢測上清中IL-12、γ榦擾素(IFN-γ)的含量,併與凍融組、單純CT26、對照組進行比較.結果 (1)採用IL-4和GM-CSF聯閤誘導小鼠骨髓細胞可培養齣典型的DC;(2)固定輻照時間,隨著HIFU輻照劑量的增加腫瘤細胞的存活率迅速減少,腫瘤細胞的碎片逐漸增多,噹聲彊為1000 W/cm2,輻照30 s時,無細胞存活,腫瘤細胞失去正常形態,全部被撕裂成碎片;(3)通過ELISA法檢測HIFU、凍融及單純CT26組上清液中IL-12、IFN-γ的含量顯著高于對照組(P均＜0.05),HIFU及凍融組上清液中IL-12、IFN-γ的含量高于單純CT26組(P均＜0.05),但HIFU、凍融組之間比較差異無統計學意義(P＞0.05).結論 HIFU能滅活腫瘤細胞併能使腫瘤細胞破碎,HIFU製備的腫瘤抗原可體外緻敏DC,併可使DC成熟分泌大量IL-12,同時誘導T細胞分泌大量IFN-γ.
목적탐토채용고강도취초초성(HIFU)복조종류세포제비종류항원치민수돌상세포(DC)화제비DC종류역묘적가행성.방법 (1)채용1 ng/ml IL-4화10 ng/ml GM-CSF연합유도소서골수세포산생DC,병용류식세포의검측DC적CD80、CD86、H-2Kd화I-Ad표체정황;(2)고정복조시간혹초성성강,응용불동성강혹복조시간적HIFU복조CT26세포주후,용태반람염색、MTT법검측활종류세포수,동시용태반람염색관찰종류세포적형태학변화,분석HIFU제량여종류세포존활솔적관계,료해제량-효응관계;(3)고정복조시간화초성강도,HIFU복조CT26세포현액,제비종류세포항원병치민DC,치민DC여T세포공부육48 h후제취상청액,통과ELISA법검측상청중IL-12、γ간우소(IFN-γ)적함량,병여동융조、단순CT26、대조조진행비교.결과 (1)채용IL-4화GM-CSF연합유도소서골수세포가배양출전형적DC;(2)고정복조시간,수착HIFU복조제량적증가종류세포적존활솔신속감소,종류세포적쇄편축점증다,당성강위1000 W/cm2,복조30 s시,무세포존활,종류세포실거정상형태,전부피시렬성쇄편;(3)통과ELISA법검측HIFU、동융급단순CT26조상청액중IL-12、IFN-γ적함량현저고우대조조(P균＜0.05),HIFU급동융조상청액중IL-12、IFN-γ적함량고우단순CT26조(P균＜0.05),단HIFU、동융조지간비교차이무통계학의의(P＞0.05).결론 HIFU능멸활종류세포병능사종류세포파쇄,HIFU제비적종류항원가체외치민DC,병가사DC성숙분비대량IL-12,동시유도T세포분비대량IFN-γ.
