中国农业科学
中國農業科學
중국농업과학
SCIENTIA AGRICULTURA SINICA
2007年
4期
842-849
,共8页
桑延霞%邓小娟%杨婉莹%刘文权%王文献%黄亚东%曹阳
桑延霞%鄧小娟%楊婉瑩%劉文權%王文獻%黃亞東%曹暘
상연하%산소연%양완형%류문권%왕문헌%황아동%조양
昆虫%抗真菌肽%毕赤酵母%分泌型表达%抗真菌活性鉴定
昆蟲%抗真菌肽%畢赤酵母%分泌型錶達%抗真菌活性鑒定
곤충%항진균태%필적효모%분비형표체%항진균활성감정
[目的]黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)抗真菌肽Drosomycin (Drs)及其同系物Drosomycin-like C (Drs-lC)和斑腹刺螠蝽(Podisus maculiverntris)抗真菌肽Thanatin对丝状真菌具有广谱高效的抑杀作用.实现抗真菌肽基因在酵母中的高效分泌型表达,对探讨利用转基因酵母的发酵液直接进行果蔬、食品和农产品防腐保鲜的生物技术研发有重要意义.[方法]将Drosomycin基因(Drs)及其同系物基因Drs-lC和Thanatin基因分别与酵母分泌型表达载体pPICZαA重组,构建成重组表达质粒pPICZαA-Drs、pPICZαA-Drs-lC和pPICZαA-Thanatin.利用电转化将重组质粒转化毕赤酵母GS115,经表型筛选和PCR鉴定获得的重组毕赤酵母转化子,在甲醇诱导下进行抗真菌肽的分泌表达.[结果]3种抗真菌肽基因的酵母表达产物对6个供试真菌中的5个有明显的抑制作用,Thanatin同时对供试细菌有抗菌活性.[结论]Drs、Drs-lC和Thanatin抗真菌肽基因成功地转化毕赤酵母,并实现其分泌型表达.
[目的]黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)抗真菌肽Drosomycin (Drs)及其同繫物Drosomycin-like C (Drs-lC)和斑腹刺螠蝽(Podisus maculiverntris)抗真菌肽Thanatin對絲狀真菌具有廣譜高效的抑殺作用.實現抗真菌肽基因在酵母中的高效分泌型錶達,對探討利用轉基因酵母的髮酵液直接進行果蔬、食品和農產品防腐保鮮的生物技術研髮有重要意義.[方法]將Drosomycin基因(Drs)及其同繫物基因Drs-lC和Thanatin基因分彆與酵母分泌型錶達載體pPICZαA重組,構建成重組錶達質粒pPICZαA-Drs、pPICZαA-Drs-lC和pPICZαA-Thanatin.利用電轉化將重組質粒轉化畢赤酵母GS115,經錶型篩選和PCR鑒定穫得的重組畢赤酵母轉化子,在甲醇誘導下進行抗真菌肽的分泌錶達.[結果]3種抗真菌肽基因的酵母錶達產物對6箇供試真菌中的5箇有明顯的抑製作用,Thanatin同時對供試細菌有抗菌活性.[結論]Drs、Drs-lC和Thanatin抗真菌肽基因成功地轉化畢赤酵母,併實現其分泌型錶達.
[목적]흑복과승(Drosophila melanogaster)항진균태Drosomycin (Drs)급기동계물Drosomycin-like C (Drs-lC)화반복자의춘(Podisus maculiverntris)항진균태Thanatin대사상진균구유엄보고효적억살작용.실현항진균태기인재효모중적고효분비형표체,대탐토이용전기인효모적발효액직접진행과소、식품화농산품방부보선적생물기술연발유중요의의.[방법]장Drosomycin기인(Drs)급기동계물기인Drs-lC화Thanatin기인분별여효모분비형표체재체pPICZαA중조,구건성중조표체질립pPICZαA-Drs、pPICZαA-Drs-lC화pPICZαA-Thanatin.이용전전화장중조질립전화필적효모GS115,경표형사선화PCR감정획득적중조필적효모전화자,재갑순유도하진행항진균태적분비표체.[결과]3충항진균태기인적효모표체산물대6개공시진균중적5개유명현적억제작용,Thanatin동시대공시세균유항균활성.[결론]Drs、Drs-lC화Thanatin항진균태기인성공지전화필적효모,병실현기분비형표체.