畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2007年
7期
708-712
,共5页
陈红军%侯义宏%白华%陈桂来%吴时友%尹燕博%钱永华%田振宇
陳紅軍%侯義宏%白華%陳桂來%吳時友%尹燕博%錢永華%田振宇
진홍군%후의굉%백화%진계래%오시우%윤연박%전영화%전진우
猪流感病毒%基因芯片%多重PCR%核酸杂交
豬流感病毒%基因芯片%多重PCR%覈痠雜交
저류감병독%기인심편%다중PCR%핵산잡교
根据流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)亚型基因序列间的差异性,分别设计H1、H3、H9、N1和N2的特异分型引物,并根据M基因设计A型流感病毒的通用引物.RT-PCR扩增猪流感病毒各亚型HA、NA和M基因的特异片段,克隆至pMD18-T构建重组质粒,制备探针.将各探针按一定的阵列点加到硝酸纤维素膜上,制成基因芯片.并对217份不同地区的样品进行检测.结果表明:该芯片可以同时检测待检样品中5种亚型A型流感病毒,并显示了较高的灵敏度和特异性,灵敏度比PCR高1个稀释度,比病毒分离高2个稀释度.该方法的建立为猪流感的检测及猪流感病毒各亚型在猪群中的流行病学调查提供了一种快速、灵敏和高通量的手段.
根據流感病毒血凝素(HA)和神經氨痠酶(NA)亞型基因序列間的差異性,分彆設計H1、H3、H9、N1和N2的特異分型引物,併根據M基因設計A型流感病毒的通用引物.RT-PCR擴增豬流感病毒各亞型HA、NA和M基因的特異片段,剋隆至pMD18-T構建重組質粒,製備探針.將各探針按一定的陣列點加到硝痠纖維素膜上,製成基因芯片.併對217份不同地區的樣品進行檢測.結果錶明:該芯片可以同時檢測待檢樣品中5種亞型A型流感病毒,併顯示瞭較高的靈敏度和特異性,靈敏度比PCR高1箇稀釋度,比病毒分離高2箇稀釋度.該方法的建立為豬流感的檢測及豬流感病毒各亞型在豬群中的流行病學調查提供瞭一種快速、靈敏和高通量的手段.
근거류감병독혈응소(HA)화신경안산매(NA)아형기인서렬간적차이성,분별설계H1、H3、H9、N1화N2적특이분형인물,병근거M기인설계A형류감병독적통용인물.RT-PCR확증저류감병독각아형HA、NA화M기인적특이편단,극륭지pMD18-T구건중조질립,제비탐침.장각탐침안일정적진렬점가도초산섬유소막상,제성기인심편.병대217빈불동지구적양품진행검측.결과표명:해심편가이동시검측대검양품중5충아형A형류감병독,병현시료교고적령민도화특이성,령민도비PCR고1개희석도,비병독분리고2개희석도.해방법적건립위저류감적검측급저류감병독각아형재저군중적류행병학조사제공료일충쾌속、령민화고통량적수단.
