中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2007年
10期
768-772
,共5页
阳玉梅%黄维义%代华龙%郑小龙%石云良%张为宇
暘玉梅%黃維義%代華龍%鄭小龍%石雲良%張為宇
양옥매%황유의%대화룡%정소룡%석운량%장위우
沼泽型水牛%单个核细胞%IL-4%IL-5%克隆%测序
沼澤型水牛%單箇覈細胞%IL-4%IL-5%剋隆%測序
소택형수우%단개핵세포%IL-4%IL-5%극륭%측서
从刀豆素A(Concanavalin A,ConA)刺激的广西沼泽型成年水牛外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中提取总RNA,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-5(IL-5)基因,分别克隆到pMD18-T载体上,进行序列分析.结果表明,从培养9 h、17 h的单个核细胞中扩增得到的IL-4基因在核苷酸水平上与GenBank上登录的印度水牛IL-4 cDNA序列同源性为98.8%,与牛、绵羊、猪和马的同源性分别为99.3%、94.1%、84.8%和80.6%;氨基酸水平的同源性分别为96.3%、98.5%、90.4%、78.4%和59.6%.从培养12 h的单个核细胞中扩增得到的IL-5基因在核苷酸水平上与GenBank上登录的牛、绵羊、猪和马IL-5 cDNA序列同源性分别是99.0%、96.5%、89.6%和89.1%;氨基酸水平的同源性分别为97.8%、96.2%、85.9%和86.7%.本研究为进一步了解水牛IL-4和IL-5的结构和水牛免疫学特性奠定了基础.
從刀豆素A(Concanavalin A,ConA)刺激的廣西沼澤型成年水牛外週血單箇覈細胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中提取總RNA,用逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)方法擴增齣白細胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白細胞介素-5(IL-5)基因,分彆剋隆到pMD18-T載體上,進行序列分析.結果錶明,從培養9 h、17 h的單箇覈細胞中擴增得到的IL-4基因在覈苷痠水平上與GenBank上登錄的印度水牛IL-4 cDNA序列同源性為98.8%,與牛、綿羊、豬和馬的同源性分彆為99.3%、94.1%、84.8%和80.6%;氨基痠水平的同源性分彆為96.3%、98.5%、90.4%、78.4%和59.6%.從培養12 h的單箇覈細胞中擴增得到的IL-5基因在覈苷痠水平上與GenBank上登錄的牛、綿羊、豬和馬IL-5 cDNA序列同源性分彆是99.0%、96.5%、89.6%和89.1%;氨基痠水平的同源性分彆為97.8%、96.2%、85.9%和86.7%.本研究為進一步瞭解水牛IL-4和IL-5的結構和水牛免疫學特性奠定瞭基礎.
종도두소A(Concanavalin A,ConA)자격적엄서소택형성년수우외주혈단개핵세포(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)중제취총RNA,용역전록취합매련식반응(RT-PCR)방법확증출백세포개소-4(Interleukin-4,IL-4)화백세포개소-5(IL-5)기인,분별극륭도pMD18-T재체상,진행서렬분석.결과표명,종배양9 h、17 h적단개핵세포중확증득도적IL-4기인재핵감산수평상여GenBank상등록적인도수우IL-4 cDNA서렬동원성위98.8%,여우、면양、저화마적동원성분별위99.3%、94.1%、84.8%화80.6%;안기산수평적동원성분별위96.3%、98.5%、90.4%、78.4%화59.6%.종배양12 h적단개핵세포중확증득도적IL-5기인재핵감산수평상여GenBank상등록적우、면양、저화마IL-5 cDNA서렬동원성분별시99.0%、96.5%、89.6%화89.1%;안기산수평적동원성분별위97.8%、96.2%、85.9%화86.7%.본연구위진일보료해수우IL-4화IL-5적결구화수우면역학특성전정료기출.
