植物学报
植物學報
식물학보
BULLETIN OF BOTANY
2012年
3期
248-256
,共9页
李迪%唐振鑫%刘海静%曾庆银%杨海灵
李迪%唐振鑫%劉海靜%曾慶銀%楊海靈
리적%당진흠%류해정%증경은%양해령
克隆%酶活性%谷胱甘肽转移酶%毛白杨%蛋白结构
剋隆%酶活性%穀胱甘肽轉移酶%毛白楊%蛋白結構
극륭%매활성%곡광감태전이매%모백양%단백결구
谷胱甘肽转移酶(glutathione S-transferase,GST)在植物的抗逆反应、细胞信号转导和抗病等方面发挥着重要作用.从毛白杨(Populus tomentosa)中克隆到2个Phi类GS7因(PtoGSTF1和PtoGSTF2),它们分别编码215和218个氨基酸残基的蛋白质.DNA序列分析显示这2个基因均含有2个内含子.组织表达模式分析表明,这2个基因在毛白杨的根、茎、叶、韧皮部和顶芽组织中均表达,是组成型表达基因.在大肠杆菌中表达这2个基因并纯化重组蛋白.酶活性分析显示PtoGSTF1和PtoGSTF2蛋白对底物CDNB、NBD-CI、NBC和Cum-OOH都具有酶学活性,但活性差异较大.动力学分析显示,PtoGSTF2对NBD-CI的亲和力是PtoGSTF1的2.5倍,但PtoGSTF1的催化效率是PtoGSTF2的56.8倍.热力学稳定性分析显示,PtoGSTF1比PtoGSTF2具有更高的热力学稳定性.因此,酶学性质的差异预示着这2个Phi类GS7基因可能存在功能上的分化.
穀胱甘肽轉移酶(glutathione S-transferase,GST)在植物的抗逆反應、細胞信號轉導和抗病等方麵髮揮著重要作用.從毛白楊(Populus tomentosa)中剋隆到2箇Phi類GS7因(PtoGSTF1和PtoGSTF2),它們分彆編碼215和218箇氨基痠殘基的蛋白質.DNA序列分析顯示這2箇基因均含有2箇內含子.組織錶達模式分析錶明,這2箇基因在毛白楊的根、莖、葉、韌皮部和頂芽組織中均錶達,是組成型錶達基因.在大腸桿菌中錶達這2箇基因併純化重組蛋白.酶活性分析顯示PtoGSTF1和PtoGSTF2蛋白對底物CDNB、NBD-CI、NBC和Cum-OOH都具有酶學活性,但活性差異較大.動力學分析顯示,PtoGSTF2對NBD-CI的親和力是PtoGSTF1的2.5倍,但PtoGSTF1的催化效率是PtoGSTF2的56.8倍.熱力學穩定性分析顯示,PtoGSTF1比PtoGSTF2具有更高的熱力學穩定性.因此,酶學性質的差異預示著這2箇Phi類GS7基因可能存在功能上的分化.
곡광감태전이매(glutathione S-transferase,GST)재식물적항역반응、세포신호전도화항병등방면발휘착중요작용.종모백양(Populus tomentosa)중극륭도2개Phi류GS7인(PtoGSTF1화PtoGSTF2),타문분별편마215화218개안기산잔기적단백질.DNA서렬분석현시저2개기인균함유2개내함자.조직표체모식분석표명,저2개기인재모백양적근、경、협、인피부화정아조직중균표체,시조성형표체기인.재대장간균중표체저2개기인병순화중조단백.매활성분석현시PtoGSTF1화PtoGSTF2단백대저물CDNB、NBD-CI、NBC화Cum-OOH도구유매학활성,단활성차이교대.동역학분석현시,PtoGSTF2대NBD-CI적친화력시PtoGSTF1적2.5배,단PtoGSTF1적최화효솔시PtoGSTF2적56.8배.열역학은정성분석현시,PtoGSTF1비PtoGSTF2구유경고적열역학은정성.인차,매학성질적차이예시착저2개Phi류GS7기인가능존재공능상적분화.
