CAJ | 학술논문

目的评价脂质体介导的内皮抑素(ES)基因转移抑制缺氧诱导的小鼠视网膜新生血管的效果.探讨基因转移抑制视网膜新生血管的可行性.方法制备阳离子脂质体及PCDNA3-ES复合物.选1周龄C57Bl/6N小鼠置于氧浓度为(75±2)%的氧箱中5 d.回到正常环境中诱导视网膜新生血管模型.在小鼠离开氧箱的当日,向ES注射组鼠玻璃体腔注射2 μl脂质体PCDNA3-ES复合物;载体对照组注射等量脂质体空白载体复合物;空白对照组小鼠注射等量PBS.采用ES抗体免疫组化方法检测ES蛋白在视网膜的表达;回到正常环境中后5 d,采用荧光标记的右旋糖酐血管灌注下视网膜铺片方法观察视网膜新生血管的分布;组织学切片观察比较突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数量;透射电镜观察ES转移对视网膜超微结构的影响.结果免疫组化检查发现ES 注射组小鼠玻璃体腔注射ES后24 h 开始有ES表达,主要位于视网膜神经纤维层细胞中,维持至少2周仍见表达;视网膜铺片观察可见空白对照组在无灌注区边缘均可见新生血管芽及荧光渗漏.ES注射组见新生血管芽明显减少;组织学检查ES注射组较其他两组突破视网膜内界膜的细胞数量减少,差异有统计学意义;ES转移后电镜下视网膜各层超微结构未见明显改变.结论采用玻璃体腔注射方法行脂质体介导的内皮抑素基因转移可以一定程度抑制缺氧诱导的小鼠视网膜新生血管生长,对视网膜无明显的毒副作用.应进一步优化转移条件以提高治疗效果.
목적평개지질체개도적내피억소(ES)기인전이억제결양유도적소서시망막신생혈관적효과.탐토기인전이억제시망막신생혈관적가행성.방법제비양리자지질체급PCDNA3-ES복합물.선1주령C57Bl/6N소서치우양농도위(75±2)%적양상중5 d.회도정상배경중유도시망막신생혈관모형.재소서리개양상적당일,향ES주사조서파리체강주사2 μl지질체PCDNA3-ES복합물;재체대조조주사등량지질체공백재체복합물;공백대조조소서주사등량PBS.채용ES항체면역조화방법검측ES단백재시망막적표체;회도정상배경중후5 d,채용형광표기적우선당항혈관관주하시망막포편방법관찰시망막신생혈관적분포;조직학절편관찰비교돌파시망막내계막적혈관내피세포수량;투사전경관찰ES전이대시망막초미결구적영향.결과면역조화검사발현ES 주사조소서파리체강주사ES후24 h 개시유ES표체,주요위우시망막신경섬유층세포중,유지지소2주잉견표체;시망막포편관찰가견공백대조조재무관주구변연균가견신생혈관아급형광삼루.ES주사조견신생혈관아명현감소;조직학검사ES주사조교기타량조돌파시망막내계막적세포수량감소,차이유통계학의의;ES전이후전경하시망막각층초미결구미견명현개변.결론채용파리체강주사방법행지질체개도적내피억소기인전이가이일정정도억제결양유도적소서시망막신생혈관생장,대시망막무명현적독부작용.응진일보우화전이조건이제고치료효과.