自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2003年
4期
412-416
,共5页
陈艳%郭洪年%姜瑛%李常青%赵文明%田颖川
陳豔%郭洪年%薑瑛%李常青%趙文明%田穎川
진염%곽홍년%강영%리상청%조문명%전영천
千穗谷苋菜%抗菌肽%Ah-AMP基因%转基因烟草%抗病性
韆穗穀莧菜%抗菌肽%Ah-AMP基因%轉基因煙草%抗病性
천수곡현채%항균태%Ah-AMP기인%전기인연초%항병성
通过PCR从苋属植物千穗谷(Amarathus hypochondriacus)的总DNA中扩增出苋菜抗菌肽(Ah-AMP)的核基因片段,序列分析结果表明该基因长261bp,编码一个由86个氨基酸组成的Ah-AMP前体多肽.在构建Ah-AMP基因的植物表达载体pBinAH916后,通过根癌土壤杆菌介导方法转化了烟草.转化再生植株和T 1 代转基因烟草的PCR和Southern blot分析表明,Ah-AMP基因已整合到烟草的染色体中,并为单拷贝整合.T 1 代转基因烟草的Northern blot分析结果表明,Ah-AMP基因在转基因烟草中至少在mRNA水平上能正常表达.对T 0 代转基因烟草进行烟草青枯病的抗病性试验,筛选出两株抗性较强的植株.对T 1 代抗青枯病的统计分析发现,其抗病性比起始品种SR1分别提高了2.24和1.62个级别;其病情指数比起始品种降低49.6%和37.3%.对黑胫病也表现一定的抗性,主要表现在推迟发病时间,减缓发病速度上.这些结果表明Ah-AMP基因在植物抗病基因工程研究中可能是一个有潜在应用价值的基因.
通過PCR從莧屬植物韆穗穀(Amarathus hypochondriacus)的總DNA中擴增齣莧菜抗菌肽(Ah-AMP)的覈基因片段,序列分析結果錶明該基因長261bp,編碼一箇由86箇氨基痠組成的Ah-AMP前體多肽.在構建Ah-AMP基因的植物錶達載體pBinAH916後,通過根癌土壤桿菌介導方法轉化瞭煙草.轉化再生植株和T 1 代轉基因煙草的PCR和Southern blot分析錶明,Ah-AMP基因已整閤到煙草的染色體中,併為單拷貝整閤.T 1 代轉基因煙草的Northern blot分析結果錶明,Ah-AMP基因在轉基因煙草中至少在mRNA水平上能正常錶達.對T 0 代轉基因煙草進行煙草青枯病的抗病性試驗,篩選齣兩株抗性較彊的植株.對T 1 代抗青枯病的統計分析髮現,其抗病性比起始品種SR1分彆提高瞭2.24和1.62箇級彆;其病情指數比起始品種降低49.6%和37.3%.對黑脛病也錶現一定的抗性,主要錶現在推遲髮病時間,減緩髮病速度上.這些結果錶明Ah-AMP基因在植物抗病基因工程研究中可能是一箇有潛在應用價值的基因.
통과PCR종현속식물천수곡(Amarathus hypochondriacus)적총DNA중확증출현채항균태(Ah-AMP)적핵기인편단,서렬분석결과표명해기인장261bp,편마일개유86개안기산조성적Ah-AMP전체다태.재구건Ah-AMP기인적식물표체재체pBinAH916후,통과근암토양간균개도방법전화료연초.전화재생식주화T 1 대전기인연초적PCR화Southern blot분석표명,Ah-AMP기인이정합도연초적염색체중,병위단고패정합.T 1 대전기인연초적Northern blot분석결과표명,Ah-AMP기인재전기인연초중지소재mRNA수평상능정상표체.대T 0 대전기인연초진행연초청고병적항병성시험,사선출량주항성교강적식주.대T 1 대항청고병적통계분석발현,기항병성비기시품충SR1분별제고료2.24화1.62개급별;기병정지수비기시품충강저49.6%화37.3%.대흑경병야표현일정적항성,주요표현재추지발병시간,감완발병속도상.저사결과표명Ah-AMP기인재식물항병기인공정연구중가능시일개유잠재응용개치적기인.
